ГОСТ 31468—2012
8.4.2 Окраска по Граму
Из колоний, отобранныхдля биохимическойидентификации, готовятмазки иокрашиваютпо Граму
поГОСТ IS07218. Бактериирода Salmonella — грамотрицательныепалочкисзакругленнымиконцами.
При использовании в исследованиях тест-наборов для биохимической идентификации бактерий
рода Salmonellaокрашивание по Граму не обязательно.
8.4.3 Определение биохимических свойств культуры
Биохимические свойства у отобранных и предварительно пересеянных грамотрицательных куль
тур по8.4.1 определяютпоспособностиферментации глюкозы, сахарозы иманнита, расщеплениямоче
вины, образования ацетоина, индола, р-галактозидазы, L-лизиндекарбоксилазы.
Для определения биохимических свойств используют специальные среды: трехсахарный агар
Олькеницкого (см. 7.4.25), среды Гисса (см. 7.4.17) либо одну из комбинированных сред: Клиглера
(см. 8.4.22), Ресселя-ГРМ (см. 7.4.24) и другие комбинированные среды по 7.4.36.
Для посевов в специальные среды подготовленный материал по 8.4.1 отбирают бактериальной
петлей с поверхности и центра колонии, не касаясь поверхности агара. Исследуют не менеетрох типич
ных колоний из каждойчашки.
Полученный материал засевают штрихом по поверхности скошенной среды и уколом по центру
столбика в его толщу.
Посевы инкубируют при температуре (37 ♦1) °С в течение (24 ±3)ч, после чего просматривают.
8.4.3.1 Определение ферментации сахаров
Для определения ферментации сахаров используют одну из сред по 8.4.3. Посев и инкубирова
ние — по 8.4.3.
Интерпретация результатов поизменениям среды:
Агар Клиглера содержит два сахара, поэтому по скошенной поверхности учитывают только фер
ментацию лактозы:
- малиновый цветскошенной поверхности среды указывают на ферментацию лактозы.
Среды Олькеницкого:
- пожелтение самого столбика среды указывает на ферментацию глюкозы (глюкоза положи
тельная);
- пожелтение скошенной поверхностисреды указывает на ферментацию лактозы и/или сахарозы
(лактоза и/или сахароза положительная),
- красный или неиэменившийся столбик среды указывает на отсутствие ферментации глюкозы
(глюкоза отрицательная);
- красная или неизменившаяся скошенная поверхность среды указывает на отсутствие фермен
тациилактозы и/или сахарозы (лактоза и/или сахароза отрицательная);
- пузырьки или разрывы в толще среды указывают наобразование газа из глюкозы;
- черный цвет среды указывает на образование сероводорода.
TSI-arap:
- пожелтение поверхности TSI-arapa (см. 7.3.18) указывает на ферментацию лактозы (лактоза
положительная).
Типичныекультуры бактерий рода Salmonella показывают щелочную (красную) поверхностьи кис
лый (желтый)столбикс образованием газа (пузырьков).
Определение ферментации маннита исахарозы
Для определения ферментации маннита илисахарозы используют среды Гисса (см. 7.4.17)с ман
нитом или сахарозой. Посев иинкубирование — по8.4.3.
При ферментации маннита цветсреды изменяется.
Бактерии рода Salmonella: ферментируют глюкозусобразованием кислоты и газа или кислоты без
образования газа; ферментируют маннит с образованием кислоты; не ферментируют лактозу и
сахарозу.
Определениеферментации сахаров с помощьюдисков с углеводами
Для определения ферментации бактериями рода Salmonella сахаров допускается использование
дисков с углеводами (см. 7.3.9). Методика проведения испытаний по инструкции производителя.
8.4.3.2 Определение образования сероводорода
Для определенияобразования сероводорода используютодну из питательных сред: Олькеницко
го(см. 7.4.25)илисредуКлиглера(см. 7.4.22).или 1%-нуюпептонную воду(см. 7.4.33). Посевы инкубиру
ют при температуре (37 • 1) °Св течение от 24до 72 ч.
При посеве культуры в одну из комбинированных сред об образовании сероводорода судят по
почернению среды в столбике.
7