ГОСТ 31468—2012
Для большегоэффекта передвнесением навески продукта пептоммо-буфернуюсредуили другую среду
для предварительного меселективного обогащения нагревают в водяной бане до температуры (37
± 1)вС.
Подготовленную пелтонно-буферную среду или другую средудля предварительного неселектив
ного обогащения инокулируют при комнатной температуре навеской продукта массой (25 ±0.1) г. Соот
ношениемеждуколичеством высеваемого продуктаиколичеством неселективнойсреды 1:10: (25 ±0.1)г
пробы на (225,0 ±0.1)см3 среды. Посевы инкубируют при температуре(37 ± 1)еС в течение (18
1
2)ч.
8.1.3Вслучае, если масса пробыдругая, чем (25± 1)г,соотношение междуколичеством высевае
мого продукта и количеством неселективнойсреды 1:10.
В случае если исследуют больше одной пробы от определенного продукта и когда очевидно, что
объединенная навеска не влияет на результат испытания, то для уменьшения объема работы навески
объединяют, соблюдая при посеве соотношение между массой общей навески иколичеством неселек
тивной среды 1:10.
8.2 Селективное обогащение
8.2.1 Культуры из среды для предварительного неселективного обогащения по 8.1 пересевают в
две среды для селективного обогащения.
Для этого 0.1 см1культуры, полученной по 8.1.2, пересевают в (10,0 ± 0.1) см3среды Раппапор-
та-Вассилиадиса с соей (RVS-бульон) (см. 7.4.6) и 1.0 см3культуры, полученной по 8.1.2. пересевают в
(10.0 1 0,1) см3в одну из сред: тетратионатный бульон (Мюллер-Кауфмана) (см. 7.4.3), селенитовую
обогатительную (см. 7.4.2), селенит-цистиновый накопительный бульон (см. 7.4.4), магниевую
(см. 7.4.5). модифицированную полужидкую среду MSRV (см. 7.4.7) или другую среду для селективного
обогащения (см. 7.4.36).
Посевы на RVS-бульоне инкубируют при температуре (41,5
1
1.0) °С в течение (24 * 3)ч.
Посевы на тетратионатном бульоне (Мюллер-Кауфмана), магниевой, селенитовой обогатитель
ной. селенит-цистиновых средах инкубируют при температуре (37 ± 1)вС в течение (24 ±3) ч.
При посеве на модифицированную полужидкуюсреду MSRV0,1 см3культурыизсреды дляпредва
рительного неселективного обогащения пересевают на поверхность MSRVсреды. Для большей селек
тивности допускается распределить посевную дозу (0,1 см3) на три точки внесения по центру чашки
Петри. Посевы на модифицированной полужидкойсреде MSRV инкубируют втечение (24 ±3)ч притем
пературе (41,511,0) °С. Чашки Петри не переворачивают. При отсутствии роста через (24 ±3) ч посевы
дополнительно инкубируют в течение (24
1
3) ч. Для подвижных штаммов сальмонелл характерендиф
фузный рост в толще этой среды отцентра к периферии.
8.2.2 На другихсредах (см. 7.4.36). предназначенныхдляселективного обогащения, посевы инку
бируют при температуре и с экспозицией поинструкции по их применению.
8.2.3 Прямой посев в среды для селективного обогащения
Продукты свежие, которые не были подвергнуты каким-либо физическим воздействиям (сушке,
заморозке и другим воздействиям), допускается высевать непосредственно в селективные среды,
исключая этап предварительного неселективногообогащения.
Соотношение между количеством высеваемого продукта и количеством селективной среды
1:10:(25,0 i 0,1) гпробы на (225,010,1) см3среды. В случаеобъединения навески продукта — по 8.1.3.
8.3 Выделение чистой культуры на дифференциально-диагностических агаризованных
средах и идентификация
8.3.1Для выделения чистой культуры после инкубирования на селективных средах по8.2 прово
дят высев посевного материала на две агаризованные дифференциально-диагностические среды: на
XLD-arap (см. 7.4.13) ина однуизсред: висмут-сульфитныйагар (см. 7.4.8), средуПлоскирева (см. 7.4.9),
среду Эндо (см. 7.4.10), средуЛевина (см. 7.4.11). бриллиантово-зеленый агар (см. 7.4.12).
Для получения отдельных хорошо изолированных колоний бактериологической петлей (1 мкл)
берут минимальное количество посевного материала и проводят высев штрихом по ГОСТ 26670 на
поверхность чашек Петри с подсушеннымидифференциально-диагностическими средами.
С модифицированной полужидкой MSRV среды (см. 8.2.1) бактериологической петлей (1 мкл)
берут материал с границы зоныдиффузного роста, осторожно касаясь поверхности среды, не захваты
вая сам агар, ипереносят на поверхностьдифференциальнойсреды штрихом по ГОСТ 26670.
Чашки Петри с посевами переворачивают вверхдном, помещают в термостат при температуре
(37 * 1)5Сиинкубируютвтечение(24 ±3)ч. Предварительныйучетрезультатовпроводятчерез(24
1
3)ч,
окончательный — через (4813) ч.
5