ГОСТ 31468—2012
Типичные культуры бактерий рода Salmonella примерно в 90 % случаев образуют сероводород
(черный цвет среды).
8.4.3.3 Дальнейшему изучению подвергают культуры с типичными или не совсем типичными
свойствамидля бактерий рода Salmonella: бактерии, ферментирующие глюкозусобразованием или без
образования газа, а также лактозоположительные бактерии и бактерии, не образующие сероводород,
но обязательно ферментирующие глюкозу с образованием или без образования газа.
8.4.3.4 Определение расщепления мочевины
При определении расщепления мочевины используют агар Кристенсена с мочевиной (см. 7.4.15),
агар тройной сахарный по 7.4.14 или другие среды по 7.4.36.
Культуры засевают штрихом по поверхности скошенной среды в пробирках. Посевы инкубируют
при температуре (371 1)°С втечение(24 *3)4, периодическинаблюдая за посевами (для уреазоположи-
тельных бактерий реакциячасто становитсявидимой уже после 2ч инкубирования).
Агар Кристенсена
Изменение цвета фенолового красного от розового до светло-вишневого свидетельствует о рас
щеплении мочевины с выделением аммония — положительная реакция.
Отсутствие изменения окраски — отрицательная реакция.
Агар тройной сахарный
Восстановлениеизменившегося цвета среды при расщепленииглюкозы с красногоили желтогодо
бледно-розового цвета свидетельствуето расщеплении мочевины — положительная реакция.
Отсутствие изменения окраски — отрицательная реакция.
Бактерии рода Salmonella мочевинуне расщепляют.
8.4.3.5 Определениеобразования индола
Для определения образования индола проводят посев в пробирку, содержащую 5 см3одной из
питательных сред: 1 %-ную пептонную воду (см. 7.4.33), бульон Хоттингера (см. 7.4.16) или в трип-
тон-триптофановую среду (см. 7.4.20). Посевы инкубируют при температуре (37 ♦ 1) °С в течение
(24 i 1)ч.
Пептонная вода
В пробирки ссуточной культурой впептонной воде постенкедобавляют 1 см3,покаплям, одного из
реактивов: Эрлиха (см. 7.3.5) или Ковача (см. 7.3.6).
Среактивом Эрлиха при наличии индоланепозднее чемчерез 5мин впограничном слоеобразует
ся ярко-красное кольцо — положительная реакция. Кольцо остается светло-желтого цвета — отрица
тельная реакция.
Среактивом Ковачарезультаты учитываютчерез 10мин послевзбалтывания. Реактивподнимает
ся на поверхность среды и при наличии индола окрашивается в темно-красный цвет — положительная
реакция.
Бульон Хоттингера. триптон-триптофановая среда
В пробирки с суточной культурой в бульоне Хоттингера (см. 7.3.16) или триптон-триптофановой
среде(см.7.3.20)постенкедобавляют 1 см3,покаплям,одного изреактивов: Эрлиха(см. 7.3.5) или Кова
ча по 7.3.6.
Не позднее чем через 5 мин образование темно-красного кольца указывает на образование индо
ла — реакция положительная; коричнево-желтое кольцо — реакция отрицательная.
Бактерии рода Salmonella индола не образуют.
8.4.3.6 Определение образования ацетоина (реакцияФогес-Проскауера)
Для определения способности к образованию ацетоина испытуемую культуру петлей засевают в
пробирки с3 см3 мясо-пептонного бульона с глюкозой (см. 7.4.32) или VP среды (см. 7.4.34).
Посевы инкубируют при температуре (37 ± 1) °С в течение (24 ± 3) ч. После инкубации к 1 см3
отобранной в стерильную пробирку культуральной жидкости прибавляют две капли раствора креатина
моногидрата, три капли спиртового раствора 1-нафтола идве капли раствора гидроокиси калия, приго
товленные по 7.3.4. Содержимое пробирки перемешивают после прибавления каждого реактива. Появ
ление через 15 минот розовогодосветло-красного окрашиванияуказываетнаположительную реакцию.
При отрицательной реакции остаток культуральной жидкости инкубируют еще (24 i 3) ч и тест повто
ряют.
Определение образования ацетоина допускается проводить без применения раствора креатина.
Для этого после инкубирования к 1см3 отобранной культуральной жидкости прибавляют только 0,6 см3
раствора 1-нафтолаи 0.2 см3раствора гидроокисикалия. Послеприбавления каждогореактивапробир ку
встряхивают. Появление розового окрашивания через 15 мин указывает на положительную реакцию. При
отрицательнойреакцииостатоккультуральнойжидкостиинкубируютеще(24 ±3)чи тестповторяют.
8