ГОСТ ISO 18153—2011
Введение
Согласно современным представлениям метрологическая прослеживаемость значений, припи
санных калибраторам и контрольным материалам, должна бытьобеспечена использованием имеющих
ся стандартных образцов и референтных методик выполнения измерений высшего порядка. В
соответствии с этой концепцией был разработан стандарт IS 017511 по метрологической прослеживае
мости. который описывает иерархический порядок методик выполнения измерений и калибровочных
материалов. Общие правила, изложенные в этом стандарте, применимы также и к величинам, отражаю
щим каталитическую активность ферментов. По возможности, метрологическая прослеживаемость
должна быть продемонстрированадо единицы Международной системы единиц (единицы СИ), которая
возглавляет иерархию калибровки.
В настоящем стандарте описана иерархия калибраторов и методик выполнения измеренийдля из
мерения концентрации каталитической активности ферментов (далее — каталитическая концентра
ция). Для измерений ферментов производная согласованная единица СИ «моль на секунду-кубический
метр» или «катал на кубический метр» (согласно резолюции Генеральной конференции по весам и ме
рам) является верхним уровнем иерархии с первичной референтной методикой выполнения измерений,
до которой должны быть, по возможности, прослежены методики выполнения измерений, калибраторы
и контрольные материалы низшего уровня.
Ферменты в крови и других биологических жидкостях могут быть измерены для диагностических
целей через их каталитические концентрации. Аналитический принцип измерения скорости каталити
ческого изменения субстрата обладает значительными преимуществами благодаря быстроте, низкому
порогу обнаружения, аналитической специфичности и малой стоимости. Результаты измерений катали
тической активности сравнимы только при выполнении измерений в одних и тех же условиях. Поэтому
описание фермента как измеряемой величины не может ограничиватьсятолько названием рода величи
ны (каталитической активности), наименования фермента и системы, а требует также указания задан
ной методики выполнения измерений, особенно индикаторного компонента реакции.
Методика выполнения измерений верхнего уровня иерархии калибровки должна быть междуна
родно признана. Примером может служить принятая Международной федерацией клинической химии и
лабораторной медицины референтная методика выполнения измерений креатинкиназы по скорости
превращения никотинамидадениндинуклеотида (НАДН).
Таким образом, первичная референтная методика выполнения измерений является составной
частью определения измеряемой величины и должна включать в себя следующее;
- вид субстрата (если специфичность фермента позволяет, возможны вариации) и его концентра
цию;
- активаторы и их концентрации;
- направление каталитической реакции;
- индикаторный компонент;
- буферную систему и pH;
- температуру,
- длительность предынкубационного периода;
- материал, используемый для запуска реакции;
- время задержки;
- продолжительность реакции.
Недостатки, связанные с зависимостью определения фермента как измеряемой величины и ре
зультатов его измерений от методики выполнения измерений, хорошо известны; проблемы при проведе
нии внешней оценки качества исследований и при оценке воспроизведения методов; существование
множественности биологических референтных интервалов и связанного с этим риска неправильной
клинической интерпретации результатов исследований ферментов.
Стандартизация рутинных измерений ферментов важна для лабораторной медицины, поскольку
она способствует повышению клинической значимости и сопоставимости результатов путем устранения
различий биологических референтных интервалов.
Существуют два подхода;
а)постоянное использованиетолько рекомендованной или стандартизованной методики для каж
дого фермента;
IV