ГОСТ Р ИСО 10272-1—2010
Слой инкубируют при температуре 25 °С в аэробной атмосфере (6.14) в течение (44 + 4) ч.
Исследуют слой с целью выявления видимого роста колоний Campylobacter.
9.4.5 Исследование аэробного роста при температуре 41,5 °С
Используя колонии, изолированные по 9.4.2.2, инокулируют при помощи петли (6.11) поверхность
слоя колумбийского кровяного агара (5.4.1).
Слой инкубируют при температуре 41,5 °С в аэробной атмосфере (6.14) в течение (44 + 4) ч.
Исследуют слой с целью выявления видимого роста колоний Campylobacter.
9.4.6 Обнаружение оксидазы
Используя платиново-иридиевую петлю или стеклянную палочку (6.11). отбирают порцию четко
изолированной колонии из каждой отдельной чашки (Э.4.2.2) и наносят на фильтровальную бумагу,
смоченную реактивом для обнаружения оксидазы (5.4.3). Появление лилового, сиреневого или темно-
синего цвета в течение 10 с свидетельствует о положительной реакции. Если используется имеющийся в
продаже набор для анализа оксидазы, необходимо следовать инструкциям изготовителя.
Результаты подтверждают, используя положительный и отрицательный контроль. Примерами под
ходящих контрольных штаммов являются Pseudomonas aeruginosa NCTC’ 10662 (положительный кон
троль) и Escherichia coli NCTC* 9001 (отрицательный контроль).
9.4.7 Интерпретацию Campylobacter spp. проводят по результатам таблицы 1.
Т аб лиц а 1 — Характеристики Campylobacter spp.
Наименование показателя
Характеристика
Морфология (9.4.3)
Малые искривленные бациллы
Подвижность (9.4.3)
Характерная
Микроаэробный рост при температуре 25 °С (9.4.4)
—
Аэробный рост при температуре 41,5 °С (9.4.5)
—
Оксидаза (9.4.6)
+
Campylobacter spp. присутствует, если по меньшей мере одна колония демонстрирует вышеука
занные характеристики.
9.5Идентификация вида Campylobacter (альтернативная процедура)
9.5.1 Общие положения
Из Campylobacter spp.. произрастающих при температуре 41,5 °С, чаще всего встречаются Campy
lobacter jejuni и Campylobacter coli. Вместе с тем были описаны другие виды (Campylobacter lari, Cam
pylobacter upsaliensis и некоторые другие): характеристики, приведенные в таблице 2. позволяют про
вести их дифференциацию.
9.5.2 Определение каталазы
Для каждой колонии, отобранной в соответствии с Э.4.2.2. помещают петлю культуры в каплю
раствора пероксида водорода (5.4.4) на чистом предметном стекле.
Испытание считается положительным, если в точение 30 с появляются пузырьки.
Результаты подтверждают, используя положительный и отрицательный контроль. Примерами
подходящих контрольных штаммов являются Staphylococcus aureus NCTC* 8532 (положительный кон
троль), Enterococcus faecalis NCTC* 775 (отрицательный контроль).
9.5.3 Определение чувствительности к налидиксовои кислоте и цефалотину
Для каждой колонии, отобранной в соответствии с 9.4.2.2, используют петлю (6.11) с целью при
готовления суспензии в бульоне Бруцелла (5.4.2), плотностью 0,5 по шкале МакФарланда.
Суспензию разбавляют в отношении 1:10 тем же бульоном.
Заливают суспензией поверхность слоя с 5 %-ным кровяным агаром Мюллера-Хинтона (5.4.6).
Выдерживают в течение 5 мин. сливают избыток суспензии. Чашки высушивают в сушильном шка
фу (6.2) при 37 °С в течение 10 мин.
Помещают на поверхность агара диск с налидиксовои кислотой и диск с цефалотином (5.4.7).
Чашки инкубируют крышками вниз при температуре 37 °С в течение (22 * 2) ч в микроаэробной
атмосфере (6.14).
’ Национальная коллекция типовых культур (National collection of type cultures. NCTC).
5