ГОСТ Р ИСО 10272-1—2010
и поверхностью агара, направленной вниз в сушильном шкафу (6.2), в течение 30 мин или до того момента, ког да
поверхность агара не будет содержать видимой влаги. Если они были приготовлены заранее, невысушенные
агаровые слои следует хранить не более 4 ч при температуре окружающей среды или не более семи дней при
температуре (3 г 2) ’С.
В.4 Бульон Бруцелла
В.4.1 Состав:
продукт ферментативного переваривания казеина — 10,0 г;
продукт ферментативного переваривания животных тканей — 10.0 г;
глюкоза — 1,0 г,
дрожжевой экстракт — 2,0 г;
натрия хлорид — 5,0 г;
натрия гидросульфит — 0,1 г;
вода — 1000 см3.
В.4.2 Приготовление
Компоненты для базовой среды или готовую обезвоженную среду растворяют в воде, постепенно нагревая.
При необходимости корректируют pH таким образом, чтобы после стерилизации он составлял (7,3 -г 0,2) при тем
пературе 25 °С. Базовую среду объемом 10 см3 распределяют в колбы подходящей емкости. Стерилизуют в авто
клаве (6.1) при температуре 121 °С в течение 15 мин.
В.5 Реагент для обнаружения оксидазы
В.5.1 Состав:
N,N.N’,N’-TeTpaMeTHn-1,4-фенилендиамина дигидрохлорид — 1.0 г:
вода — 100.0 см3.
В.5.2 Приготовление
Компоненты растворяют в воде непосредственно перед использованием.
В.6 Реагенты для обнаружения гидролиза гиппурата
В.6.1 Раствор гиппурата натрия
В.6.1.1 Состав:
натрия гиппурат — 10,0 г
фосфатно-буферный солевой раствор (PBS):
натрия хлорид — 8.5 г,
динатрия гидрофосфат дигидрат (Na2HP04-2H20) — 8,98 г.
натрия дигидрофосфат моногидрат (NaH2P04-H20) — 2,71 г.
вода — 1000,0 см3.
В.6.1.2 Приготовление
Гиппурат натрия растворяют в растворе PBS. Стерилизуют путем фильтрации. Соблюдая стерильность,
реагент объемом 0.4 см3распределяют в малые колбы надлежащей вместимостью (6.7). Хранят при температуре 20
°С.
В.6.2 Раствор нингидрина, 3,5 % (масса/объем)
В.6.2.1 Состав:
нингидрин — 1.75 г;
ацетон — 25 см3;
бутанол — 25 см3.
В.6.2.2 Приготовление
Нингидрин растворяют в смеси ацетон’бутанол. Раствор хранят в холодильнике в темноте не более одной
недели.
В.7 Кровяной агар Мюллера-Хинтона
В.7.1 Базовая среда
В.7.1.1 Состав:
продукт ферментативного переваривания животных тканей — 6,0 г;
продукт ферментативного переваривания казеина — 17,5 г,
крахмал растворимый — 1.5 г,
агар — 8,0— 18,0 г1*,
вода — 1000 см3.
В.7.1.2 Приготовление
Компоненты для среды или готовую обезвоженную базовую среду растворяют в 1000 см3 воды и постепенно
доводят до кипения. При необходимости корректируют pH таким образом, чтобы после стерилизации он составлял
1> В зависимости от прочности геля агара.
10