ГОСТ Р ИСО 21527-1—2010
Добавляют 10 см31%-ного раствора хлорамфеникола (массовая концентрация) в этаноле и пере
мешивают. Распределяютсреду в большом количестве в удобные контейнеры (6.5) подходящей емкос
ти. Стерилизуют в автоклаве при температуре 121 °С в течение 15 мин.
Затем среду немедленно охлаждают в водяной бане (6.3). поддерживаемой при температуре от
44 °Сдо 47 °С. Охлаждаютдо температуры ниже 50 °С ираспределяют в объеме по 15см3 в стерильные
чашки Петри (6.6).
Оставляют средудо затвердевания и, при необходимости, сушат поверхность чашек, какописано
в ИСО 7218 и ИСО/ТС 11133-1 и ИСО/ТС 11133-2.
Среды используют немедленно или хранят в темноте согласно ИСО/ТС 11133-1 и
ИСО/ТС 11133-2.
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ! Следует избегать воздействия света на среду, поскольку в результате недо
оценки микофлоры в образцах могут быть образованы цитотоксические продукты распада.
5.2.1.2.2 Факультативное добавление гидрохлорида хлортетрациклина
Если возникают сложности из-за чрезмерного бактериального роста (например, при использова
нии сырого мяса), рекомендуется использовать хлорамфеникол (50 мг/дм3) и хлортетрациклин
(50 мг/дм3). В этом случае приготовляют среду, как описано выше, только с использованием 50 мг хло
рамфеникола. распределяют ее в объеме по 100 см3и стерилизуют. Готовят также раствор 0,1 %-ного
гидрохлорида хлортетрациклина (массовая концентрация) в воде (будучи относительно неустойчивым
в растворе, он должен быть свежеприготовленным) и стерилизуют фильтрацией. Непосредственно пе
ред использованием добавляют 5 см3 этого раствора асептически к 100 см3 основной среды и разлива
ют в чашки. Использование гентамицина не рекомендуется, так как согласно представленным данным
он вызывает ингибирование некоторых видов дрожжевых грибов.
5.2.1.2.3 Факультативное добавление микроэлементов
Для идентификации плесневых грибов на среде DRBC перед обработкой в автоклаве добавляют
раствор следующих микроэлементов в объеме 1см3на литрсреды: ZnS04 - 7Н20 — 1г; CuS04■5Н20 —
0.5 г; вода дистиллированная или деионизированная — 100 см3((1)).
5.2.1.2.4 Факультативное добавление тергитола
Для предотвращения чрезмерного роста микроорганизма Mucoraceae на агаровых пластинах ре
комендуется добавление к культуральной среде тергитола (1 см^дм3).
5.2.1.3Испытание рабочих характеристик для гарантии качества питательной среды
5.2.1.3.1 Общие вопросы
DRBC является твердой средой. Продуктивность и селективность — по ИСО/ТУ 11133 (все части)
со следующими техническими и условиями:
5.2.1.3.2 Продуктивность
Инкубация:
5 дней при (25 £ 1) °С.
Штаммы:
Saccharomyces cerevisiae АТСС 9763,
Candida albicans АТСС 10231,
Aspergillus nigerATCC 16404.
Mucor racemosus ATCC 42647
или штаммы, зарегистрированные как эквивалентные в других грибковых семействах.
Эталонные среды:
партия сред SDA (декстрозный агар Сабуро), уже валидированных.
Контрольный метод:
количественный.
Критерии:
коэффициент продуктивности. PR £ 0.5.
Характеристическая реакция:
характеристические колонии/пропагулы/зародыши согласно каждому виду.
5.2.1.3.3 Селективность
Инкубация:
5 дней при (25
±
1) вС.
Штаммы:
Escherichia coli АТСС 25922 или
4