ГОСТ Р 53752—2009
8.1.2 Приготовление подвижной фазы для жидкостной хроматографии
Раствор ацетата аммония массовой концентрацией 0.8 г/дм3,приготовленный по8.1.1. смешивают
с ацетонитрилом в соотношении 65:35. Указанное соотношение является примерным, поскольку для
обеспечения оптимального разделения пиков консервантов следует подбирать оптимальный состав
подвижной фазы применительно к используемой хроматографической колонке. Полученную подвиж
ную фазу фильтруют через мембранный фильтр. Перед использованием подвижную фазудегазируютв
круглодонной колбе под вакуумом на ультразвуковой бане.
Срок хранения подвижной фазы вплотноукупоренной посуде — 7 сут.
8.1.3 Приготовление основных и рабочих растворов консервантов
В качестве стандартных веществ используют бензойную, сорбиновую. пропионовую кислоты или
их соли.
8.1.3.1 Приготовлениеосновных растворов
Пробы стандартных веществ по(10,0
1
0.1) мг помещают вмерные колбы вместимостью 50 см3. В
колбы вносят около 10 см3ацетонитриладля растворения бензойной, сорбиновой ипропионовой кислот
или такой же объем экстрагирующего раствора, приготовленного по 8.1.1, для растворения бензоата
натрия, сорбата калия и пропионата калия. Содержимое колб перемешивают до полного растворения
кристаллов, после чего объем содержимого вколбахдоводят до метки экстрагирующим раствором. Кол
бытщательно перемешивают, получают основные растворы.
Массовые концентрации бензойной, сорбиновой ипропионовой кислот в растворах, приготовлен
ных из самих кислот, составляют 200 мг/дм3. Массовая концентрация бензойной кислоты в растворе,
приготовленном избензоата натрия, составляет 144 мг/дм3.Массовая концентрация сорбиновой кисло
тыврастворе, приготовленном из сорбата калия, составляет 150 мг/дм3. Массовая концентрация пропи
оновой кислоты врастворе, приготовленном из пропионата кальция, составляет 112 мг/дм3.
8.1.3.2 Приготовление рабочих растворов
Изосновных растворов готовят не менее пяти рабочих растворов каждой кислоты вдиапазонемас
совых концентраций бензойной кислоты 0,2—1,5 мг/дм3, сорбиновой кислоты 0.1—3.0 мг/дм3и пропио
новой кислоты 0,1—2.5 мг/дм3 путем точного разведения основных растворов экстрагирующим
раствором вмерной колбе вместимостью 100см3.Растворыдозируютс помощьюпипеточногодозатора.
Приготовленные рабочие растворы фильтруют через мембранный фильтр.
Срок хранения основных и рабочих растворов при температуре (4 12) °С в плотно укупоренной
посуде: бензойной кислоты — 6 мес.. сорбиновой и пропионовой кислот — 2 мес.
8.1.4 Подготовка хроматографа к работе
8.1.4.1 Условия хроматографирования:
- длина волныдетектора — 235 нм;
- чувствительность детектора — 0,08 единицы оптической плотности по шкале (ориентировочное
значение);
- скорость потока подвижной фазы — 0.5 см3/мин (ориентировочное значение);
- температура — 50 °С;
- подвижная фаза; ацетат аммония с ацетонитрилом.
Проверку оптимальности условий хроматографического разделения осуществляют путем хрома
тографического анализа смешанного раствора бензойной, сорбиновой и пропионовой кислот массовой
концентрацией каждой кислоты не менее 1 мг/дм3.Данный раствор готовят из основных растворов бен
зойной. сорбиновой и пропионовой кислот по аналогии с методикой приготовления рабочих растворов
по 8.1.3.2. Для хроматографического анализа петлю инжектора полностью заполняют анализируемым
раствором. Эффективность хроматографического разделения признается удовлетворительной, если
коэффициент разделения пиковсорбиновой. бензойной и пропионовой кислот составляет не менее 1.3. В
противном случае длядостижения требуемой эффективности разделения экспериментальным путем
подбирают новый состав подвижной фазы (объемную долю ацетонитрила в ней) и скорость ее потока.
При невозможности достижения требуемых условий эффективности хроматографического разделения
аналогичным образом проводят испытания других колонок.
Чувствительность детектора устанавливают так. чтобы высота пика сорбиновой кислоты при хро
матографическом анализе рабочего раствора массовой концентрации 1мг/дм3не выходила за пределы
рабочей шкалы регистрирующего устройства, но находилась вблизи ее верхней границы.
Контроль эффективности хроматографического разделения проводят не реже одного раза вдве
недели.
8.1.4.2 Градуировка хроматографа
Проводят хроматографическийанализ всехрабочих растворов, полностьюзаполняя петлю инжек
тора. Регистрируют высоту пиков бензойной, сорбиновой ипропионовой кислот.
4