ГОСТ Р 53752—2009
Т а б л и ц а 2
Вреыя анализа, мин
Состав подвижной фазы. %
А — буферный раствор
8 — ацетонитрил
0
85
15
1
85
15
12
30
70
15
10
90
22
85
15
Время выхода синтетических красителей устанавливают при проведении градуировочных работ.
Для этого оптимальной является массовая концентрация 5.0 мкг/см3(таблица 1).
Время выхода синтетических красителей указано втаблице 3.
Т а б л и ц а 3
Наименование красителя
Длина волны поглощения, нм
Время выхода, мин
Индигокарыин
350
13.50 ±0.15
Желтый «Солнечный закат»
500
13.80 ±0.15
Азорубин
500
14.60 ±0.15
Тартразин
450
15.00 ±0.15
Понсо 4R
500
15.60 ± 0.15
9.1.6 Построение градуировочного графика
Для построения градуировочного графика измеряют площади пиков, соответствующие массовой
концентрации синтетических красителей вградуировочных растворах. По полученным данным рассчи
тывают коэффициенты регрессии а иЬпрямой У = аС, + Ьметодом наименьших квадратов.
Градуировочный график строится с учетом вычисленных значений уравнения:
У = аС, ♦ Ь.(4)
где У — площадь пика синтетических красителей:
аир — коэффициенты регрессии:
С, — массовая концентрация синтетическихкрасителей вградуировочном растворе, мкг/см3.
Контроль градуировочного графикаосуществляюткаждый раз перед началом измерений неменее
чем подвум точкам врабочем диапазоне измерений. Для контроля применяют градуировочные раство
рысинтетическихкрасителей. Полученныепри хроматографировании значения Унедолжны отклонять
ся от градуировочной прямой более чем на 5.34 % для индигокармииа; 2.96 % для желтого «Солнечный
закат»; 1.86 % для тартразина; 2.97 % для понсо 4R и 1.44 %для азорубина.
9.1.7 Подготовка проб исследуемого продукта
8.0— 10.0 гисследуемогопродукта взвешивают с записью результатадотретьегознака после запя
той. помещают в центрифужные пробирки вместимостью 25 см3, добавляют 96 %-ный этанол до метки
25 см3. Пробирки закрывают пробками, интенсивно встряхивают в течение 1—2 мин и центрифугируют
20 мин при 5000 об/мин. Отделяют верхний слой и фильтруют через мембранный фильтр размером пор
0.45 мкм. 0.02 см3подготовленной пробы вводят вхроматограф.
9.2 Проведение измерений
При анализе проб условия хроматографирования устанавливают те же, что ипри построении гра
дуировочногографика по 9.1.6. Определяют площади пиков, используя компьютерную программу. Каж
дую пробу хроматографируют по два раза.
9.3 Обработка результатов измерений
Массовую концентрацию синтетических красителей С2. мг/дм3, вычисляют поформуле
7