ГОСТ Р 52347—2005
- лизина — 100:
- метионина — 40;
- треонина — 40;
- цистина — 20;
- аргинина — 40;
- бензойной кислоты — 5.
П р и м е ч ан и я
1 Аргинин введен в состав смеси из-за частичного наложения пиков лизина и аргинина, чтобы нивелировать
влияние несимметричности пиков. Бензойная кислота может служить внутренним стандартом и одновременно
реперным пиком, облегчающим разметку электрофореграмм.
2 Допускается применение рабочих градуировочных смесей с другими концентрациями АК. при этом массо
вая концентрация бензойной кислоты должна быть 5 мг/дм3.
6.2.4 Подготовка капилляра к работе
6.2.4.1 Подготовка нового капилляра к работе
Подготовку нового капилляра к работе проводят в соответствии с руководством по эксплуатации
системы капиллярного электрофореза.
Прим ечан ие — Необходимо следить за уровнем жидкости в пробирке для слива. Не допускается пере
текание жидкости из пробирки в прибор!
6.2.4.2 Ежедневттая подготовка капилляра к работе
Если капилляр оставляли на ночь заполненным дистиллированной водой, то перед работой его
необходимо промыть раствором соляной кислоты 10 мин (6.2.1.1). дистиллированной водой 3 мин,
раствором гидроокиси натрия не менее 10 мин (6.2.1.2), снова дистиллированной водой 3 мин и затем
рабочим буферным раствором (6.2.2.1) в течение 10 мин в условиях, предусмотренных таблицей 3 для
режима «Анализ». Затем следует проконтролировать состояние капилляра, проанализировав рабочую
градуировочную смесь N9 2 (6.2.3.6) с использованием существующей градуировки по 6.2.5.
При этом, в первую очередь, обращают внимание на воспроизводимость по времени выхода. Если
время выхода определяемых компонентов отличается более чем на 5 %, капилляр промывают рабочим
буферным раствором повторно и снова проверяют стабильность градуировочной характеристики. Если
время выхода совпадает, то проверяют найденные концентрации компонентов по 6.2.5.
В том случае, если накануне в капилляре был оставлен раствор ведущего электролита, его не
промывают соляной кислотой и гидроокисью натрия. Растворы ведущего электролита в рабочих и
промывочных пробирках заменяют свежими порциями и промывают капилляр только раствором веду
щего электролита, после чего контролируют стабильность градуировочной характеристики.
6.2.4.3 Хранение капилляра
Порядок хранения капилляра при перерывах в работе зависит от интенсивности использования
прибора.
При ежедневной работе рекомендуется после окончания последнего анализа промыть капилляр
раствором тетраборнокислого натрия молярной концентрации с (Na2B .07 10Н2О) = 0.02 моль/дм3
(6.2.2.1) в течение 10—15 мин и оставить на ночь заполненным этим же раствором.
При перерывах в работе на 2—7 сут капилляр следует промыть дистиллированной водой и оста
вить заполненным ею же.
При перерывах на срок более недели капилляр необходимо после тщательной промывки дистил
лированной водой высушить и оставить в сухом состоянии. В этом случае для восстановления работо
способности капилляра его нужно подготовить к работе как новый капилляр.
6.2.5 Градуировка системы
Градуировку системы капиллярного электрофореза проводят способом одного эталона для каждо
го из двух условий проведения анализа в соответствии с процедурой, описанной в 6.3.2.
С этой целью не менее трех раз анализируют рабочую градуировочную смесь Ns>2 в условиях,
рекомендованных при определении метионина, аналогичную процедуру осуществляют в условиях, ре
комендованных при определении остальных трех аминокислот. Полученные электрофореграммы обра
батываются в соответствии с процедурой градуировки, описанной в руководстве пользователя
программы обработки данных («МультиХром» или аналогичной) и рассчитывают средние величины
градуировочных коэффициентов и их среднеквадратичные отклонения (СКО). Градуировку следует
считать успешной, если величины СКО не превышают 5 %. Выбраковку неудовлетворительных градуи
ровочных точек проводят в том случае, если отклонение площади пика и одновременно времени выхода
пика данного компонента превышает 5 % от среднеарифметических значений.
6