ГОСТ Р 52347—2005
6.2.6 Контроль стабильности градуировочной характеристики
Каждый раз перед началом измерений необходимо после подготовки капилляра проанализировать
рабочую градуировочную смесь № 2. При этом в рабочем журнале фиксируют время выхода определя
емых компонентов и их массовые концентрации, рассчитанные по существующей градуировочной ха
рактеристике. Градуировка признается стабильной, если отклонение найденных массовых концентраций
от заданных значений не превышает 5 % для метионина и цистина и 10 % — для лизина и треонина. В
противном случае анализируют рабочую градуировочную смесь №? 2 еще два раза. При повторных
отклонениях, превышающих указанные нормативы, градуировку системы проводят заново, начиная с
приготовления нового раствора рабочей градуировочной смеси № 2.
6.3Проведение измерений
6.3.1 Проведение гидролиза и получение испытуемого раствора
Навеску исследуемого продукта массой 0,1000 г помещают в стеклянную виалу или ампулу с
перетяжкой, добавляют 10 см3 раствора соляной кислоты молярной концентрации с (HCI) = 6 моль/дм3
(6.2.1.4). При гидролизе в стеклянной ампуле ее запаивают в пламени газовой горелки в месте перетяж ки.
Виалу с плотно завинченной крышкой или запаянную ампулу помещают в эксикатор, который ставят в
сушильный шкаф на 14— 16 ч при температуре 110 °С (оставляют на ночь).
По окончании гидролиза виалу или ампулу вынимают из эксикатора и охлаждают до комнатной
температуры. Содержимое слегка перемешивают и фильтруют в коническую колбу со шлифом вмести
мостью 25 см3, отбирают в стеклянную бюксу 1 см3 фильтрата и выпаривают досуха в потоке теплого
воздуха вентилятора. Бюксу охлаждают при комнатной температуре, сухой остаток растворяют в 1 см3
дистиллированной воды (испытуемый раствор).
В зависимости от объекта исследования и предполагаемого содержания АК проводят разбавление
испытуемого раствора дистиллированной водой. Рекомендуемые разбавления: для зерновых культур в
два раза (соотношение объемов испытуемого раствора и воды 1:1), для продуктов растительного (жмых,
шрот) и животного происхождения, а также комбикормов в пять раз (соотношение объемов испытуемого
раствора и воды 1:4). Отбор испытуемого раствора и воды производят с помощью микродозаторов или
градуированных пипеток.
Критерием оптимальности разбавления является то, что концентрация АК в разбавленном испы
туемом растворе не должна превышать их значений в рабочей градуировочной смеси № 2.
0.5 см3 полученного раствора помещают в пробирку Эппендорфа. центрифугируют для дегазации
при 6000 об’мин в течение 5 мин (рабочий испытуемый раствор) и используют для электрофоретичес
кого анализа.
П р и м е ч а н и е — При возникновении затруднений в разметке пиков АК на электрофорвгрэмме сухой оста
ток растворяют в 1см3раствора бензойной кислоты массовой концентрации 5 мг/дм3. Разбавление испытуемого
раствора проводят раствором бензойной кислоты массовой концентрации 5 мг/дм3(6.2.3.3).
6.3.2 Анализ рабочего испытуемого раствора
Анализ рабочего испытуемого раствора проводят дважды: для определения лизина, треонина и
цистина — в среде буферного раствора тетраборнокислого натрия (6.2.2.1) при температуре 20 °С. а
для определения метионина — в среде буферного раствора тетраборнокислого натрия с добавкой
[*-циклодекстрина (6.2.2.2) при температуре 40 °С. При анализе серии проб рационально проанализиро
вать их сначала при одном составе буфера, а затем, поменяв буфер и температуру, проанализировать те
же растворы повторно. Рекомендуемые условия анализа приведены в таблице 3.
Таблица 3 — Условия проведения анализа методом капиллярного электрофореза
Параметр
Определениелизина, треонина
ицистина
Определение метионина
Длина волны, нм
190—200 нм(конкретное значение устанавливается для каждого прибора
по методике, приведенной в приложении Б)
Ввод пробы
Пневматический (давление 30 мбар, время 15 с)
Режим анализа
Напряжение плюс 20 кВ. время 17 мин (при определении метионина
время анализа можно сократитьдо 10 мин)
Рабочий буферный раствор
По6.2.2.1
По 6.2.2
2
Температура, ®С
20
40
7