ГОСТ Р ИСО 10993-5—2009
3.2 положительный контрольный образец: Материал, который, подвергаясь исследованию в
соответствии с настоящим стандартом, проявляет цитотоксичность, при этом результаты воспроизво
димы.
П р и м е ч а н и е — Назначение положительного контрольного образца — продемонстрировать соотве
тствующую реакцию тест-системы. Например, стабилизированный оловоорганический поли(винилхлорид)11 ис
пользуют в качестве положительного контрольного образца для твердых материалов и экстрактов, разведения фе
нола — в качестве положительного контрольного образца для экстрактов.
3.3 контроль реактива: Модельная среда без исследуемого материала, которая подвергается
воздействию условий и процедур исследования.
П р и м е ч а н и е — Для целей настоящего стандарта это определение заменяет приведенное в
ИСО 10993-12. пункт 3.1.
3.4 посудадля культуры: Посуда, приемлемаядля культуры клеток, включая стеклянные чашки
Петри, пластмассовые чашкидля культуры, пластмассовыефлаконы для культуры или пластмассовые
планшеты и микротитровальные пластины.
П р и м е ч а н и е — Используют посуду, соответствующую требованиям класса ткани и подходящую для ис
пользования с клетками млекопитающих.
3.5 субконфлуэнтность: Примерно 80 % конфлуэнтности. т.е. завершение логарифмической
фазы роста.
4 Подготовка образцов
4.1 Основные положения
Исследование проводят:
a) на экстракте из материала и(или)
b
) на самом материале.
Материал должен представлять собой конечный продукт или часть конечного продукта, предназ
наченногодля применения. Подготовка образцов должна быть в соответствии с ИСО 10993-12.
4.2 Приготовление экстрактов из материала
4.2.1 Принципы экстракции
Условия приготовления экстрактов должны приближаться к условиям клинического применения,
но быть болеежесткими, чтобы определить потенциальную токсическую опасность, не вызывая значи
тельныхизмененийвисследуемомматериале, такихкаксплавление, плавлениеили растворениекусоч
ковматериала, или изменение химической структуры.
П р и м е ч а н и е — Концентрация любого эндогенного или экстрагенного вещества в экстракте, а. следова
тельно. число подвергающихся воздействию исследуемых клеток зависит от площади контакта, объема модельной
среды. pH. химической растворимости, скорости диффузии, осмомоляльности, встряхивания, температуры, време
ни и других факторов.
4.2.2 Модельная среда
Дляисследованияпроб на клетках млекопитающихнеобходимоиспользоватьследующие модель
ные среды:
a) культуральную среду ссывороткой;
b
) культуральную среду безсыворотки;
c) физиологический солевой раствор;
d) другую подходящую модельную среду.
П р и м е ч а н и е — Модепьные среды представлены по мере убывания степени предпочтительности. Вы
бор растворителя должен отражать цель экстракции, причем необходимо рассмотреть использование и полярного,
и неполярного растворителей. К другим подходящим модельным средам относят очищенную воду, растительное
масло и диметилсульфоксид (ДМСО). ДМСО известен как цитотоксичный в определенных тест-системах при кон
центрации. превышающей 0.5 % общего объема.
11 Оловоорганический поли(винилхлорид) в качестве положительного контрольного образца можно приоб
рести в SIMS Portex Ltd. Hythe. Kent. CT21 6JL. UK. (продукт № 499-300-000). Полиуретаны ZDEC и ZDBC доступны
от FDA. Исследовательского Института Хатано (Ochiai 729-5. HadanosW. Kanagawa 257 — Japan). Эта
информация приведена для удобства пользователя настоящим стандартом и не является рекламой этой
продукции со стороны ИСО.
2