ГОСТ Р 53694—2009
7 Выполнение измерений методом высокоэффективной жидкостной
хроматографии
7.1 Условия хроматографического анализа
Колонка аналитическая: длиной 250 мм и внутренним диаметром 4.6 мм, заполненная октадецил-
силикагелом. с размером частиц 5 мкм ло4.3.
Элюент: ацетонитрил/вода/уксусная кислота (15 %/ 84 %/1 %. по объему).
Температура колонки: комнатная.
Детектирование: УФ. 284 нм.
Скорость подачи элюента: 1.0см3/мин.
Объем вводимой пробы: 10—20 мкл.
7.2 Условия проведения измерений
Измерения проводятв следующихлабораторныхусловиях:
температура окружающего воздуха.................................(25
±
5) X ;
атмосферное давление....................................................(97i10)Kfla:
относительная влажность.................................................(65 • 15) %;
частота переменного тока.................................................(50^5)Гц;
напряжение в сети............................................................(220 НО) В.
7.3 Построение градуировочной зависимости
Проводят хроматографический анализ всех градуировочных растворов. Регистрируют площади
пиков 5-гидроксиметилфурфурола и строят градуировочный график — зависимость площади лика от
массовой концентрации (массовойдоли) 5-гидроксиметилфурфурола в градуировочном растворе.
Процедуры построения градуировочной зависимости выполняют в соответствии с руководством
поэксплуатации оборудования ируководством пользователя программным обеспечением.
Градуировочную зависимостьвыражают линейным уравнением
у =
к
х .(3)
Правильность построения градуировочной зависимости контролируется значением достовернос
ти аппроксимации (R2):
Я2* 0,9997.
Из уравнения(3)следует, что площадьпиковстандартных растворов 5-гидроксиметилфурфурола
S(mAU силиAU ■с)и ихмассоваяконцентрация с(мг/дм3)или массоваядоляс(млн-1)находятсявсоот
ветствующей функциональной зависимости
с
(4)
где
к
— градуировочный коэффициент. [мг/дм3/тА и с]- ’
к
=
Z<S; с,)
1с?•
(5)
где Si — площадьпика 5-гидроксиметилфурфурола при анализе/-гостандартного раствора. mAU с или
AUc;
с; — массовая концентрация или массовая доля 5-гидроксиметилфурфурола при анализе /-го стан
дартного раствора, мг/дм3(м лн1).
Градуировочную зависимостьстроятпри замене оборудования, колонок, изменении условий хро
матографического анализа или при выявлении несоответствия метрологическим требованиям резуль
татов оперативного контроля или внутреннегоаудита.
7.4 Анализ проб
Проводят хроматографический анализ проб, подготовленных по 6.2. Каждую пробу анализируют
двараза вусловиях повторяемостивсоответствиис требованиями ГОСТРИСО5725-1 (подраздел 3.14)
и ГОСТ Р ИСО 5725-2. Регистрируют площадь пика 5-гидроксиметилфурфурола. В случае, если массо вая
концентрация или массоваядоля 5-гидроксиметилфурфурола в пробе настолько максимальна, что
6