ГОСТ Р 52174-2003
Биологический микрочип представляет собой стандартное предметное стекло по ГОСТ 9284
для световой микроскопии, на поверхности которого в определенном порядке расположены
10 микроскопических ячеек (рисунок 1), заполненные полиакриламидным гелем. Каждая из пяти
верхних ячеек содержит индивидуальный ковалентно иммобилизованный олигонуклеотид (JSS, gus,
nos. npt или ocs). Три ячейки с индексом «НК» не содержат ранее перечисленных индивидуальных
ковалентно иммобилизованных олигонуклеотидов и выполняют роль отрицательного контроля
гибридизации. Две ячейки с индексом «М* содержат ковалентно связанный флуоресцентный
краситель и предназначены для однозначной ориентации биологического микрочипа. Поверхность
биологического микрочипа с ячейками должна быть закрыта пластиковой крышкой с отверстиями,
которая вместе с предметным стеклом образует замкнутое пространство, предназначенное для
проведения гибридизации анализируемой пробы.
Допускается применение других средств измерений с метрологическими характеристиками, а
также оборудования и реактивов с техническими характеристиками не хуже указанных выше.
(Поправка).
5 Отбор проб
Отбор проб проводят по национальным стандартам, устанавливающим порядок отбора проб
для однородных групп нишевого сырья (в том числе посевного и посадочного материала), пищевых
продуктов, цветов.
6 Подготовка к проведению анализа
6.1 Приготовление растворов
6.1.1 Приготовление раствора NaOH концентрации 40 г/дм3
Встеклянную плоскодонную колбу по ГОСТ 1770 вместимостью 100см1помещают 4.0 г сухой
гидроокиси натрия по ГОСТ 4328 и растворяют в 100 см’ особо чистой стерильной воды по 4.30.
После охлаждения раствора до комнатной температуры его переливают в специальную щелочеу
стойчивую пластиковую плотно закрывающуюся емкость. Срок хранения при комнатной темпера
туре —не более одного года.
6.1.2 Приготовление раствора ЭДТА концентрации 186.12 г/дм3
В стеклянную плоскодонную колбу вместимостью 100 см3 помешают 18,61 г ЭДТА по 4.24,
растворяют в 80 см’особо чистой стерильной воды при интенсивном перемешивании на магнитной
мешалке |6|. Затем раствором гидроокиси натрия по 6.1.1 доводят pH раствора до 8.0. Полученный
раствор переливают в мерную колбу по ГОСТ 12738 вместимостью 100 см3и особо чистой стериль
ной водой доводят объем этого раствора до метки. Срок хранения в холодильнике по ГОСТ 26678
при температуре 4 ‘С—5 *С —не более 6 мес.
6.1.3 Приготовление 70 %-ного раствора этилового спирта
В мерную колбу вместимостью 200 см3 по ГОСТ 12738 вносят 140 см3 96 %-ного этилового
спирта высокой степени очистки по ГОСТ Р 51652, добавляют 52 см’ особо чистой стерильной волы
и перемешивают. Срок хранения при температуре 4 ’С—5 *С —не более 6 мес.
6.1.4 Приготовление гнбрндизаиионного буфера
В стеклянный стакан или плоскодонную колбу вместимостью 300—500 см’ помешают точно
отмеренные количества: 44,33 (±0,01) г гуанидин тиоцианата —по 4.33 114|, 4,88 (±0,01) г N-12-гид-
роксиэтил|пиперазин-^-|2-этансульфоновой кислоты| натриевой соли (HEPES) по 4.34 [15|. Затем
стеклянной пипеткой по ГОСТ 29227 вместимостью 5 см3 приливают 3,75 (±0,05) см3 раствора
ЭДТА, приготовленного по 6.1.2, и цилиндром вместимостью 250 см3 добаатяют 200 см3 особо
чистой стерильной воды. Стакан с раствором помешают на магнитную мешалку по 4.9 |6| и
перемешивают до полного растворения компонентов. Доводят значение pH буфера до 7,5 (±0,1)
добавлением раствора гидроокиси натрия, приготоатенного по 6.1.1. Полученный раствор из стакана
переносят в мерную колбу вместимостью 250 см3, доводят объем до метки особо чистой стерильной
водой и рахтивают по 50 см3 в плоскодонные колбы с притертыми пробками. Срок хранения при
температуре 2 ’С—8 ‘С —не более 12 мес.
6.1.5 Приготовление раствора Трис-HCl концентрации 242,2 г/дм!
В колбу вместимостью 100 см3 помешают 24.22 г Трис (оксиметил) амипометана по 4.25 |11|
и растворяют приблизительно в 80 см3особо чистой стерильной воды. Концентрированной соляной
кислотой по ГОСТ 3118 доводят
pH
раствора до 7,5, а объем — до 100 см3особо чистой стерильной
водой. Срок хранения при комнатной температуре —не более 6 мес.
6.1.6 Приготовление раствора NaCl концентрации 146.2 г/дм3
В плоскодонную колбу вместимостью 100 см3 помещают 14,62 г хлористого натрия по
5