ГОСТ Р 52995—2008
Неразрешается использоватькапиллярс буферамидругих типов. Послеиспользования капилляр
промывают водой. Оба конца капилляра хранят в воде. В зависимостиот разностейвдавлении прибора
меняют соответственно время промывки и время впрыскивания.
9.2 Пригодность тестирующего прибора
Три раза впрыскиваютэталоннуюсмесьдля испытания. Проверяютсогласованностьвремени миг
рациии площади пика белков из испытуемой смеси. Полученная разностьдолжна быть менее 5 %(отно
сительная).
Новый капиллярможетадсорбировать белки, что ведет к увеличению площадей пиков приповтор
ных впрыскиванияходного итогожеобразца испытания. Чтобы избежатьэтого, быстросмывают капил
ляр эталонным образцом в обычном направлении в течение 6 с. Затем промывают
электрофорезным буфером в том же направлении.
П р и м е ч а н и е — Отклонения электроферограмм могут быть вызваны:
- капилляром (включая плохо отрезанное отверстие капилляра).
- недостаточной температурной стабильностью капилляра (низким уровнем охлаждающей жидкости);
- повреждением дейтериевой лампы;
- другими неисправностями прибора.
9.3 Качественный анализ
9.3.1 Анализрастворадля испытания(см. 7.2) проводятпри условияхфункционирования(см.8.1).
9.3.2 Идентификация пика
Идентификацию полученных пиков испытуемого образца проводят путем сравнения этих пиков с
электроферограммами. которые показаны на рисункахА.1 — А.З. Этиэлектрофореграммы показывают
конфигурации пиков натурального сепарированного сухого молока и образцов, подмешанных соей и
горохом в указанном порядке.
9.4 Количественный анализ
9.4.1 Анализ растворадля испытания контрольного образца (см. 8.4.2) иэталонных калибрующих
образцов проводят при условиях функционирования(см. 8.1).
9.4.2 Контрольный образец
Впрыскивают буфер для образца под давлением 3447.5 Па на 50 с. Полученная основная линия
должна быть относительно плоской.
9.4.3 Измерения
Для измерения используютследующую последовательность:
a) эталонные образцы для калибровки (см. 4.6);
b
) контрольный образец (см. 8.4.2);
c) растворыдля испытания (см. 7.2);
d) контрольный образец (см. 8.4.2);
e) эталонные образцы для калибровки (см. 4.6).
Повторяют последовательность в случае, когда число образцов для испытания составляет от
10 до 15.
9.4.4 Идентификация пика
Проводят идентификацию полученных пиков испытуемого образца, как описано в 8.3.2. Электро-
ферограммы на рисунках А.1 — А.З показывают конфигурации пиков натурального сепарированного
сухого молока исоевого игорохового белков в указанном порядке.
9.4.5 Интегрирование площадей пиков
Параметрыинтегрирования регулируюттак,чтобы интегрированиебылосравнимостем,чтопока
зано на рисунке А.2 или А.З (базовую линию чертят от впадины до впадины). Не группируют несколько
пиков водин, поскольку это вызывает неточность при расчете общей площади пиков.
Нормализованную площадь пика Ariдля каждого пика белка (/)рассчитывают поформуле
1
А»=44-
( )
гдеА, — площадь пика протеина г;
1(— время миграции пика /, мин.
Для белков гороха используют сумму нормализованных площадей пиков, рассчитанных раз
дельно.
4