ГОСТ Р 52842—2007
4.1.3 Растворители
Если требуются специальные растворители или иные хими
к
аты для растворения реактивов, то
должно быть гарантировано, чтоданные специальные растворители или иныехимические вещества не
оказывают влияния на результаты анализа.
4.1.4 Подготовка образцов
4.1.4.1 Общие положения
Для расширенной оценки (например, обобщение полученных данных) все необходимые разведе
нияделают в одной партии, чтобы избежатьрасхождений в точности взвешивания, разведения и раз
личий в состоянии «отрицательного молока».
Подготов
к
а образцов для исследования — чрезвычайно трудоем
к
ая задача для лаборатории,
проводящей оцен
к
уметода. Целесообразно использовать централизованную лабораторию, осуще
ствляющую подготов
к
у образцов и предоставляющую заинтересованнымлабораториям образцы в
стабилизированной форме (например, вглубо
к
ой замороз
к
е или лиофилизированными).
4.1.4.2 Выбор концентраций
Процедура выбора концентраций для определения предела обнаружения приведена в 4.2.2. Ори
ентировочно. если не оговорено особо, концентрация, предполагаемая как предел обнаружения, долж
набытьпроанализированавсравнениис концентрациейнауровеньбольшеееи сдвумя илитремяуров
нями концентраций меньшими, чем предполагаемый предел обнаружения, ата
к
же ссоответствующим
«отрицательным молоком». Полученные данные допус
к
ается использовать для установления кон
центраций. дающих 25 %. 50 %. 75 % и 95 % положительных результатов. Рекомендуется разделять
ранги концентраций, дающих от 50 % до 100 % положительных результатов на три или четыре равных
отрезка уровней (с линейной илогарифмической шкалой соответственно), какпоказано на рисунке 1.
4.1.4.3 Разведение
Необходимо соблюдатьследующие предосторожности при приготовлении серии разведений ана
лизируемых веществ:
а) Приготовление серии разведений следует проводить таким образом, чтобы толь
к
о в послед
нем разведении применялось моло
к
о. Это необходимо дляпредотвращения связываниявещества с
бел
к
ом.
б) Концентрация стандартного водного раствора антиба
к
териального вещества в послед
немразведениимоло
к
ом должна быть одина
к
ова для всех образцов исоставлять менее 1%.
4.1.4.4 Консервация
Консервацию образцов предпочтительнее осуществлять лиофилизацией. если это согласова
нос разработчиком/производителем исходя изданных исследований илипринципа метода. Ре
к
оменду
ется следующаяпроцедура
к
онсервации:
а) Сразу после подготовки различныхпроб молока все разведения в необходимом объеме разли
вают в пробирки изамораживают в наклонном положении при минус (18
±
2) °С;
б) Лиофилизация должна быть проведена ма
к
симально быстро, но не позднее недели после
замораживания. Впроцессе лиофилизации температура недолжна превышать25 °С:
в) Сразупослелиофилизациипробирки герметично запаиваюти хранят в темноте при температу
ре не выше 6 °С;
г) Образцы восстанавливают дистиллированной водой. Добавляемый объем воды должен быть
на 10% меньшеобъема лиофилизированного молока, компенсируемогосухим остатком молока.
д) Восстановленныеобразцы используютвдень восстановления. Используемыевосстановлен
ные образцы хранят в холодильнике иуничтожают в конце рабочегодня;
е) Допускается консервировать образцы путем глубокойзаморозки или сиспользованием некото
рых химических консервантов (см. 4.2.5.3).
4.1.5 План эксперимента
4.1.5.1 Число повторностей
Желательно, чтобы эксперимент представлял собой «слепое» исследование и максимально соот
ветствовал рекомендациям разработчика/производителя о числе повторностей и условиях опыта. Для
к
ачественного метода процент положительных результатов о т общего
к
оличества анализируе
мых образцов не зависит о т общего числа повторностей для
к
аждой
к
онцентрации аналита. Про
центный расчет в общем случае требует не менее 10—20 повторностей для каждой выбранной
концентрации. Если требуется определенная статистическая достоверность, то рассчитывают необхо
димое число повторностей. Например, с целью подтверждения должно быть проанализировано не
менее 60 образцов для определения показателя 90 % отрицательных результатов с вероятностью 95
% (т. е. один или два положительныхрезультата из 60 проанализированных образцов).
4