ГОСТ Р 52426—2005
Две-три капли свежеприготовленного по приложению В (В.5.3) реактива для
оксидазного теста помещают на фильтровальную бумагу. Затем стеклянной
палочкой, деревянным аппликатором, пластиковой или платиновой бактериологи
ческой петлей растирают часть колоний микроорганизмов на обработанной реак
тивомфильтровальной бумаге. Появлениенасыщенной сине-фиолетовой окраски
в течение 30 с считают положительной оксидазной реакцией, указывающей на
оксидазную активность. Отсутствие изменения окраски указывает на отсу
тствие оксидазной активности (отрицательную оксидазную реакцию).
В случав роста на нвселективном ТСА колонийразной морфологии, оксидаз-
ный тест выполняют на 2-3 колониях каждого типа.
Все колонии микроорганизмов, дающие отрицательную оксидазную реакцию,
учитывают как колонии колиформных бактерий иподсчитывают их.
Инкубируют посев микроорганизмов в пробирке с триптофановым бульоном,
приготовленным по приложению В (В.2). при (44.0 ± 0.5) °С в течение (21 ♦ 3) ч,
после чего определяютобразование индола путем добавления 0.2—0.3 мл реакти
ва Ковача, приготовленного по приложению В (В.5.1).
Образование вишнево-краснойокраски на поверхности триптофанового бульо
на считают положительной индольной реакцией, подтверждающей образование
индола.
Все колонии микроорганизмов, дающие отрицательную оксидазную реакцию и
положительную индольную реакцию, учитывают как колонии E.coli и подсчитыва
ют их.
При использовании коммерческих тест-систем выполнение оксидазного и
индольноготестов осуществляют согласно инструкциям изготовителя.
П ри меч ани я
1 В особых случаях может быть проведена идентификация колиформных бактерий,
например для разделения бактерий, имеющих фекальное и нефекальное происхождение.
2 В особых случаях при обнаружении выросших по 8.3.1 колоний, не имеющих харак
терной окраски по 8.3.2 и не обладающих оксидазной активностью, может быть прове
дена их идентификация на принадлежность к бактериям семейства Enterobacteriaceae
по методикам, разработанным и аттестованным в установленном порядке.
8.3.4Допускается проводить одновременное определение оксидазной
активности всех выросших на среде Эндо по 8.3.1 колоний микроорганизмов
непосредственно на мембранном фильтре без пврвсова по 8.3.3. Для этого в
чашку Петри помещают фильтровальную бумагу и обильно смачивают реак
тивомдляоксидазноготеста. приготовленнымпоприложению В(В. 5.3). Затем
переносят стерилизованным пинцетом мембранный фильтр с выросшими на
немпо 8.3.1 колониямимикроорганизмовна фильтровальнуюбумагу. Появление
насыщенной сине-фиолетовой окраски всей колонии или ее ободка в течение
0.5—5 мин считают положительной оксидазной реакцией, указывающей на
оксидазную активность.
Колонии микроорганизмов, дающие положительную оксидазную реакцию, не
учитывают. Колонии, не изменившие окраски(отрицательная оксидазнаяреак
ция), учитывают как колонии колиформных бактерий и подсчитывают их. При
необходимости проведениядальнейшей идентификации оксидазоотрицатель-
ныхколоний, пересев проводят сразуже послепроявленияреакции.
913
8