ГОСТ Р 50929-96
образования розового окрашивания, избыток шелочи нейтрализуют
раствором серной кислоты молярной концентрации с (‘/, H ,S04) = =
5 моль/дм3. Раствор фильтруют через бумажный фильтр с синей
полосой в мерную колбу вместимостью 100 см1 и доводят объем до
метки дистиллированной водой. Получают основной стандартный ра
створ витамина В5массовой концентрации 1 мг/см3. Из этого раствора
готовят рабочие растворы, содержащие 0,4; 0,8; 1,0, 1,5; 2,0; 3,0 мг
витамина В. в 50 ем’. Для этого соответственно 0,4; 0,8; 1,0; 1,5; 2,0 и 3,0
см5основного раствора помешают в 6 мерных колб вместимостью 50
см1и доводятдо метки дистиллированной водой.
Рабочие растворы анализируют на жидкостном хроматографе при
следующих условиях:
хроматографическая колонка 2 х 120 мм;
сорбент — Силзеорб С 18, Силасорб SPH С 18, Сспарон С 18;
трехкомпонентный элюент на основе уксусной кислоты,
объем пробы — 6 мкдм3;
длина волны —260 нм;
скорость подачи элюента — 80—100 мкдм’/мин;
постоянная времени —0,2 с.
Удерживаемый объем пика витамина В5 — 560 —580 мкдм5(может
меняться в зависимости отдлины колонки и плотности ее заполнении.
Каждый раствор хроматографируют 2 раза. После выхода пика колон ку
промывают, прокачивая через нее 150—200 мкдм5 элюента до
выхода на нулевую линию.
Значение средних высот хроматографических пиков (в единицах
оптической плотности с. о. п.) откладывают по оси ординат градуиро
вочного графика, а по оси абсцисс — количество витамина в 50 ем5
растнора.
Гралуироночный график строяттак же, откладывая по оси ординат
средние высоты хроматографических пиков, выраженные в единицах
дтины (миллиметрах).
Построение пхшуировочного графика можно заменить расчетом ко
эффициентов наклона
К,
мг/с. о. п., по формуле
П
I
*>
К = ^ — ,
п
где АГ— коэффициент наклона градуировочного графика для /-го
градуировочного раствора, мг/с. о. п.;
2<