ГОСТ Р 50929—96
9.1.2
Подготовка к испытанию
9.1.2.1 Приготовление элюента для хроматографии
Трехкомпонентный аноснт готовят смешиванием уксусной кисло
ты, дистиллированной воды и три.четиламина в объемном соотноше
нии 3:95:2. Для этого в мерную колбу вместимостью 500 см’ вносят
пипеткой 15 см’ концентрированной уксусной кислоты, затем цилинд
ром вносят 100 см3 дистиллированной воды и перемешивают. Добав
ляют 10 см3 триметиламина, перемешивают, доводят до метки дис
тиллированной водой и снова тщательно перемешивают. Приготовлен
ный раствор фильтруют через стеклянный фильтр ПОР 16 и помеща
ют в стеклянный сосуд с притертой пробкой. Полученный элюент
хранят не более 1 мес в холодильнике.
9.1.2.2 Подготовка хроматографической колонки
Через колонку пропускают элюент в количестве 20—30 свободных
объемов колонки, т. е. два полных шприца насоса хроматографа при
расходе элюента сначала 50 мкцм’/мин, а затем 100 мкдм’/мин. Про
мывку колонки заканчивают при получении стабильной нулевой ли
нии.
После стабилизации колонки проводят сс насыщение витами
ном В,. Для этого выполняют 7—10 анализов более концентрирован
ного градуировочного раствора витамина В}. Насыщение колонки пре
кращают, когда расхождение между последовательными определения
ми не превышает 3,0 %.
9.1.2.3 Приготовление раствора серной кислоты молярной концен
трации с (У, H ,S04) * 5 моль/дм3.
В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 30—40 см3дис
тиллированной воды идобавляют 14,2 см3 концентрированной серной
кислоты. Осторожно перемешивают идобавляют сшс 35—40 см3дне
тиллиро ванной воды. Когда раствор остынетдо комнатнойтемперату
ры, осгорожно доводятобъем дистиллированной водой до метки.
9.1.2.4 Построение градуировочного графика
В мерную колбу вместимостью 100 см3помешают 0,1 г витамина В^
и приливают 70 см3раствора соляной кислоты молярной концентра
ции с (НС1) ~ 0,1 моль/дм5. Колбу помешают в водяную баню и
нагревают в течение 10 мин притемпературе 75 ’С. Затем охлаждают и
содержимое количественно переносят в химический стакан вместимос
тью 200 см3. Добавляют 1—2 капли 1 %-ного спиртового раствора
фенолфталеина, раствор гидроокиси натрия с массовойдолей 40 % до
23