ГОСТ Р 51921-2002
Допускается использовать трипказо-соевый бульон взамен триптон-соевого бульона с дрожжевым экстрактом по А.1.1.
А.1.4 Трипказо-соевый агар (TSA)1
Состав среды на 1 дм3, г:
био-трипказа........................................15,0
био-сойаза.......................................... 5,0
хлорид натрия........................................ 5,0
агар-агар............................................ 5,0
рН............................................. 7,3±0,1
Компоненты растворяют при нагревании в 1000 см3 дистиллированной воды и тщательно перемешивают до полного растворения. Устанавливают рН (7,3±0,1) и стерилизуют при температуре (121±1) °С в течение 15 мин.
Приготовленную среду разливают в чашки Петри и хранят не более 47 сут в защищенном от света месте при температуре не выше 8 °С.
Допускается использовать трипказо-соевый агар взамен триптон-соевого агара с дрожжевым экстрактом по А.1.2.
А.2 Среды селективные для предварительного обогащения
А.2.1 Питательный бульон для выделения и культивирования листерий (ПБЛ I)
Состав основы среды на 1 дм3, г:
гидролизат казеина ферментативный......................10,0
пептон ферментативный мясной.........................15,0
гидролизат автолизованных дрожжей...................... 2,0
хлорид натрия........................................ 3,5
хлорид лития........................................ 3,0
рН............................................. 7,0±0,2
Компоненты растворяют при нагревании в 1000 см3 дистиллированной воды и тщательно перемешивают до полного растворения. Устанавливают рН (7,0±0,2) и стерилизуют в автоклаве при температуре (121±1) °С в течение 15 мин.
Перед употреблением к 1 дм3 основы среды с соблюдением правил асептики добавляют 4,44 см3 раствора селективных компонентов. Раствор готовят следующим образом: 10 мг налидиксовой кислоты, 5 мг акрифла-вина и 5 мг полимиксина В сульфата2 растворяют в 10 см3 стерильного физиологического раствора.
Приготовленную среду разливают в стерильные колбы по 225 см3 и хранят не более 2 сут в защищенном от света месте при температуре не выше 8 °С.
А.2.2 Полуконцентрированный бульон Фразера (Half Fraser broth)
А.2.2.1 Состав основы среды3 на 1 дм3, г:
гидролизат казеина ферментативный...................... 5,0
пептический отвар животной ткани....................... 5,0
дрожжевой экстракт................................... 5,0
хлорид натрия........................................20,0
дигидрофосфаткалия..................................1,35
гидрофосфат натрия...................................12,0
эскулин............................................ 1,0
хлорид лития........................................ 3,0
цитрат аммонийного железа............................. 0,5
рН............................................. 7,2±0,2
Компоненты растворяют при нагревании в 1000 см3 дистиллированной воды и тщательно перемешивают до полного растворения. Устанавливают рН (7,2±0,2) и стерилизуют в автоклаве при температуре (121±1) °С в течение 15 мин.
Перед употреблением к 1 дм3 основы среды с соблюдением правил асептики добавляют селективные компоненты: 10 мг налидиксовой кислоты и 12,5 мг акрифлавина, растворенные в 10 см3 стерильного раствора гидроокиси натрия концентрации 0,2 г/дм3.
12
1
По прописи фирмы «BioMerieux.», Франция.
2
Допускается применение других веществ, обладающих аналогичными ингибиторными свойствами.
3
По прописи фирмы «HiMedia Lab. Ltd.», Индия.