11
- Баня водяная с электрическим или водяным подогревом.
- Весы лабораторные по ГОСТ Р 53228, обеспечивающие точность взвешивания с пределом абсолютной допускаемой погрешности не более + 0,1 мг.
- Электроплитка по ГОСТ 14919.
- Цилиндр 1-250-2 по ГОСТ 1770.
- Колбы мерные 1-50-2,1-100-2,1-1000-2 по ГОСТ 1770.
- Пробирки 1-14-120 по ГОСТ 25336.
- Стаканы химические В-1-50, В-1-500 по ГОСТ 25336.
- Пипетки 1-2-1-1(5) по ГОСТ 29227.
- Пролин, ч.д. а., эталон.
- Нингидрин 1-водный с массовой долей основного вещества не менее 98 %.
- Монометиловый эфир этиленгликоля с массовой долей основного вещества не менее
- %.
- Кислота муравьиная, ч. д. а. по ГОСТ 5848.
- Спирт изопропиловый, х. ч. по ГОСТ 9805.
- Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
6.11.3 Подготовка к испытанию
- Приготовление раствора пролина
40 мг пролина по 6.11.2.13 количественно переносят дистиллированной водой по 6.11.2.18 в мерную колбу вместимостью 100 см3 по6.11.2.9, перемешивают до полного растворения кристаллов, после чего объем в колбе доводят водой до метки, тщательно перемешивают.
Раствор хранят при температуре 4 °С в течение 180 сут.
- Приготовление 50 %-ного (объемного) водного раствора изопропилового спирта [1:1(об)]
В химический стакан вместимостью 500 см3 отмеряют по 250 см3 дистиллированной воды и изопропилового спирта по 6.11.2.17, перемешивают.
Раствор хранят при комнатной температуре в течение 180 сут.
- Приготовление раствора нингидрина в монометиловом эфире этиленгликоля массовой концентрацией 30 мг/ см3
- г нингидрина по 6.11.2.14 переносят по ГОСТ 1770 в мерную колбу вместимостью 100 см3 моно- метиловым эфиром этиленгликоля по 6.11.2.15, растворяют до полного исчезновения кристаллов, после чего объем в колбе доводят до метки монометиловым эфиром этиленгликоля, тщательно перемешивают.
Раствор используют свежеприготовленным.
- Приготовление раствора меда
2,5 г меда растворяют дистиллированной водой и количественно переносят в колбу вместимостью 50 см3 по ГОСТ 1770, доводят объем водой до метки, тщательно перемешивают.
- Проведение испытания
- Построение графика градуировочной зависимости
Из приготовленного по 6.11.3.1 раствора пролина отбирают в мерные колбы вместимостью 100 см3 по 1,0; 2,5; 5,0 и 10,0 см3, разбавляют дистиллированной водой, доводят до метки, тщательно перемешивают. Получают растворы массовой концентрацией пролина соответственно 0,004; 0,01; 0,02 и 0,04 мг/см3. Из полученных растворов пипеткой по 6.11.2.12 отбирают по 0,5 см3 и вносят в пробирки по 6.11.2.10. В каждую пробирку добавляют по 0,25 см3 концентрированной муравьиной кислоты по
- см3 раствора нингидрина по 6.11.3.3, закрывают, перемешивают и ставят на 15 мин в кипящую водяную баню. Пробирки с растворами переносят в водяную баню с температурой 70 °С, в каждую из них добавляют по 5 см3 50 %-ного водного раствора изопропилового спирта по 6.11.3.2, закрывают пробками, тщательно перемешивают и выдерживают в течение 10 мин, затем вынимают и охлаждают до комнатной температуры. Перемешивают и измеряют экстинкцию при длине волны 510—520 нм параллельно с раствором сравнения, составленным из 0,5 см3 дистиллированной воды, 0,25 см3 концентрированной муравьиной кислоты, 1 см3 раствора нингидрина и 5 см3 50 %-ного изопропилового спирта в кюветах по 6.11.2.2.
Оптическую плотность каждого раствора определяют не менее трех раз.
Вычисляют среднее арифметическое значение оптической плотности для каждого раствора, если абсолютное расхождение (Омакс - Омин) результатов трех определений не превосходит значения критического диапазона CR0 95(3), приведенного в таблице 5.