12
- При отсутствии дейтерированных производных бета-адреностимуляторов используют метод абсолютной градуировки. Градуировочные растворы бета-адреностимуляторов (не менее трех уровней массовой концентрации от 1 до 100 нг/см3 на пробу) вносят в заведомо чистые матрицы на стадии внесения внутреннего стандарта также, как для метода с дейтерированными производными. Каждый градуировочный уровень анализируют не менее двух раз.
- Расчеты коэффициента отклика и площади пика выполняют с помощью системы обработки данных в автоматическом режиме.
- Градуировочную характеристику считают приемлемой, если рассчитанное программным обеспечением значение квадрата коэффициента корреляции для каждого бета-адреностимулятора > 0,98, а значение «Accuracy» для каждой точки градуировочной кривой находится в диапазоне 80 %—120 %.
- Построение новой градуировочной кривой проводят после каждого включения газового хроматографа (остановка работы для сервисного обслуживания или текущей профилактики).
- Условия хроматографических измерений
- Газовый хроматограф с масс-спектрометрическим детектором включают в соответствии с руководством (инструкцией) по эксплуатации и устанавливают параметры, рекомендуемые изготовителем капиллярных колонок. Например, для кварцевой капиллярной колонки 30 м х 0,25 мм х 0,25 мкм применяют следующие хроматографические условия:
- газ-носитель — гелий;
- скорость потока газа-носителя 0,8 см3/мин;
- температура инжектора 280 °С;
- инжектор в режиме без деления потока;
- температурная программа колонки:
начальная температура 100 °С в течение 0,5 мин;
программируемый нагрев от 100 °С до 200 °С со скоростью 25,0 °С/мин;
программируемый нагрев от 200 °С до 225 °С со скоростью 4,0 °С/мин;
программируемый нагрев от 225 °С до 270 °С со скоростью 20,0 °С/мин;
- изотерма при температуре 270 °С до 20 мин;
- время анализа 20 мин;
- объем пробы от 1 до 5 мм3.
Допускается использование других хроматографических условий, обеспечивающих разделение компонентов пробы.
- Градуировку и настройку масс-спектрометрического детектора в режиме электронной ионизации и тандемной масс-спектрометрии проводят согласно инструкции по эксплуатации прибора.
- Отбор проб
- Отбор проб
- Отбор проб мяса и мясных продуктов, включая мясо и продукты из мяса птицы, — по ГОСТ Р 51447.
- Объем отбираемых проб мочи должен быть не менее 40 см3.
Объем отбираемых проб желчи должен быть не менее 30 см3.
Масса отбираемых проб пигментированной шерсти, не менее 10 г.
Отобранные пробы мочи ижелчи при отсутствии возможности испытания вдень отбора замораживают при температуре минус 20 °С.
- Отбор проб комбикормов — по ГОСТ 13496.0.
7.2 Подготовка проб
- Обработка проб органов, тканей, мочи, желчи, шерсти животных и кормов
- 100 г мышечной ткани, предварительно очищенной от грубой соединительной ткани, измельчают на гомогенизаторе и взвешивают на весах по 10,0 г гомогенизированной пробы в двух флаконах вместимостью по 40 см3. Во флаконы добавляют 20 см3трис-буфера (6.1.1), 10 мг протеолитического фермента и пипеточным дозатором вносят по 50 мм3 раствора дейтерированных стандартных образцов массовой концентрации 10 нг/см3.
Флаконы закрывают крышкой с тефлоновой прокладкой и помещают на нагревательный модуль с магнитной мешалкой при температуре 55 °С на 3 ч. Затем флаконы с полученным гидролизатом охлаждают до комнатной температуры, измеряют рН и, при необходимости, доводят значение рН до 5,0 хлорной кислотой. Флаконы с пробами помещают на центрифугу и центрифугируют при 3000 об/мин в течение 20 мин при температуре 4 °С. Полученный супернатант переносят в стеклянные флаконы вместимостью по 40 см3. Осадок повторно экстрагируют 5 см3 фосфатного буферного раствора (6.1.2). Полученные гидролизаты объединяют, измеряют рН и, при необходимости, доводят значение рН до
хлорной кислотой, помещают на центрифугу и центрифугируют при 3000 об/мин в течение 20 мин, фильтруют через мембранный фильтр.