ГОСТ Р 51278-99
Приготовление
Растворяют компоненты или полностью обезвоженную среду в поде при кипячении. В случае
необходимости регулируют показатель pH таким образом, чтобы после стерилизации он составил
7,0 при 25 "С.
Разливают эту среду в пробирки согласно 6.9 по 15 см3 на одну пробирку, или в колбы, или
сосуды (6.9) подходящей емкости таким образом, чтобы среда занимала приблизительно половину
объема такой колбы или сосуда.
Стерилизуют эту среду вавтоклаве согласно 6.1 при температуре (121 ± 1) ‘С в течение 20 мин.
Если приготовленную среду используют сразу, то ее охлаждают перед использованием в
водяной бане согласно 6.7 при температуре (45 ± 0,5) ‘С.
Если приготовленную среду не используют сразу после ее приготовления, то перед началом
микробиологических анализов, чтобы избежать задержек при разливе агаризованной среды, ее
следует расплавить в кипящей водяной бане, а затем охладить перед использованием в водяной бане
согласно 6.7 при температуре (45 ± 0,5) *С.
5.3.2Агариювапиая сре()адля подсчета количества дрожжевых и плесневыхгрибов(агариювапиая
среда с дрожжевым экстрактом, глюкозой и х.юрамфениколам)
Состав: дрожжевой экстракт — 5,0 г; глюкоза (С,,Н|20 6) — 20 г; хлорамфеникол
(C,,H|>CI2 N ,0,) — 0,1 г; агар — от 9 до 18 г4; вода — 1000 см*.
Приготовление агаризованной среды
Растворяют компоненты в кипящей воде. Если необходимо, регулируют pH таким образом,
чтобы после стерилизации он составлял 6.6 при 25 *С.
Разливают среду по сосудам (6.9) соответствующей емкости.
Стерилизуют среду в автоклаве (6.1) при температуре (121 ± 1) *С в течение 15 мин.
Если среду используют сразу после ее приготовления, ее охлаждают в водяной бане (6.7) при
температуре (45 ± 0,5) ’С.
Если же приготовленная среда не будет использована сразу после приготовления, то перед
началом микробиологических анализов, чтобы избежать задержки при разливе агаризованной
среды, ее полностью расплавляют в кипящей водяной бане, затем охлаждают перед использованием в
водяной бане (6.7) при температуре (45 ± 0,5) “С.
П р и м е ч а н и е — Хлорамфеникол может быть заменен океитетрациклином (C,2H!ftN,Ou ). В этом
случае готовят основную среду так, как это описано выше, но не добавляют хлорамфеникол. Разливают среду по
100 см3 и стерилизуют. Готовят 0,1 %-ный раствор окситетрацнклина гидрохлорида в воде и стерилизуют его
после фильтрования. Непосредственно перед использованием добаатяют асептически К) см3 раствора к 100
см3основной среды, которая была расплаатсна. и сохраняют при температуре (45 ± 0.5) ‘С.
6 Лабораторное оборудование и стеклянная посуда
П р и м е ч а н и е —Оборудование одноразового использования яатяется приемлемой заменой стеклян
ной посуде многоразового использования, если такое оборудование имеет соответствующую спецификацию.
Пользуются обычным микробиологическим лабораторным оборудованием, которое перечис
лено ниже.
6.1 Оборудование для сухой стерилизации (термостат) или .тля паровой стерилизации (авто
клав), причем автоклав может либо работать отдельно, либо япляться частью общего оборудования
для пригогоатеиия и распределения питательной среды.
Оборудование, которое вступает в соприкосновение с растворителем, питательной средой или
пробой, особенно если это оборудование пластмассовое44, должно быть простерилизоваио, за
исключением тех случаев, когда оборудование поставляется стерильным. Стерилизация должна
производиться одним из следующих методов:
а) стерилизация в термостате (6.1) при температуре от 170 до 175 "С не менее 1 ч;
б) стерилизация в автоклаве (6.1) при температуре (121 ± I) ’С не менее 20 мин.
6.2 Об о ру д о в
а
и и е для с м е ш и в а н и я
Для смешивания желательно использовать один из следующих видов оборудования:
а) ротационный смеситель, желательно с верхним приводом, имеющий частоту вращения от
8000 до 45000 м и н 1, со стеклянными или металлическими сосудами, желательно оснащенными
крышками, устойчивыми к условиям, при которых проводится стерилизация:
* В соответствии с инструкциями фирмы-изготовителя.
** Используется оборудование из термостойких пластмасс.
3