С. 2 ГОСТ 28566-90
канамицин сульфат во флаконах по 0,5 г —500 000 ЕД и I г — 1000 000 ЕД. в ампулах по 5 и
10 см35 % раствора, содержащих 0,25 и 0.5 г препарата;
полимиксин М сульфат во флаконах по 500 000 ЕД;
эскулин;
натрия гидрокарбонат (NaHCO,) по ГОСТ 4201.
3. ПОДГОТОВКА К ИСПЫТАНИЮ
3.1. Приготовление растворов
3.1.1. Раствор с объемной долей пероксида водорода 10 %:
33.3 см3пероксида водорода с содержанием основного вещества 30 % (в случае если пероксид
водорода имеет другое содержание основного вещества, то делается пересчет) переносят в мерную
колбу вместимостью 100 см3, доводят объем дистиллированной водой до метки.
3.1.2. Раствор с массовой долей НО 5 %:11.5 см концентрированной соляной кислоты пере
носят в мерную колбу вместимостью 100 см3, доводят объем дистиллированной водой до метки.
3.1.3. Раствор массовой концентрацией натрия гидроксида 50 г/дм3: 5 г натрия гидроксида
переносят в мерную колбу вместимостью 100 см3, растворяют в дистиллированной воде. Раствор
доливают до метки.
3.1.4. Раствор 2-, 3-, 5-трифснилтетразолий хлорида (ТГХ) массовой концентрацией
10 г/дм3:1г ТТХ переносят, смываядистиллированной водой в мерную колбу вместимостью 100 см3,
доводят объем дистиллированной водой до метки. Раствор стерилизуют методом мембранной фильт
рации по ГОСТ 26670. В темной плотно закрытой посуде раствор хранят при (4 ± 2) ’С не более
3 мес.
3.1.5. Раствор массовой концентрацией теллурита калия 20 г/дм3: 2 г теллурита калия перено
сят. смывая дистиллированной водой в мерную колбу вместимостью 100 см3, доводят объем дистил
лированной водой до метки. Раствор стерилизуют методом мембранной фильтрации по ГОСТ
26670.
3.1.6. Спиртовой раствор массовой концентрацией бромтимолового синего 16 г/дм3:
1.6 г бромтимолового синего переносят в мерную колбу вместимостью 100 см3 и растворяют в
этиловом спирте с массовой долей % %. Раствор доливают этиловым спиртом до метки.
3.1.7. Раствор массовой концентрацией кристаллического фиолетового 0.1 г/дм3: 0.01 г крис
таллического фиолетового переносят в мерную колбу вместимостью 100 см3и растворяют вдистил
лированной воде. Раствор доливают до метки.
3.1.8. Спиртовой раствор массовой концентрацией бромкрезолового пурпурного 16 г/дм3:
1.6 г бромкрезолового пурпурного переносят в мерную колбу вместимостью 100 см3и растворяют в
этиловом спирте с массовой долей 96 %. Раствор доливают этиловых! спиртом до мегки.
3.1.9. Раствор массовой концентрацией натрия азида 100 г/дм3: 10 г натрия азида переносят в
мерную колбу вместимостью 100 см3, растворяют при легком подогревании в дистиллированной
воде и раствор доливают до метки. Раствор готовят под вытяжкой, так как пары натрия азида
ядовиты.
3.1.10. Раствор массовой концентрацией канамицина сульфата 50 г/дм3 (50 000 000 ЕД) и
100 г/дм3(100 0(H) 000 ЕД): во флаконы с 0,5 г или 1 г препарата вносят 10 см3стерильной дистил
лированной воды, содержимое флаконов растворяют.
3.1.11. Молоко обезжиренное готовят по ГОСТ 10444.1.
3.1.12. Растворы для окраски по Граму готовят по ГОСТ 10444.1.
3.2.Приготовление питательных сред
3.2.1. Лзидно-глюкозный бульон
Основа среды: к 1дм3мясопептонпого бульона, приготовленного по ГОСТ 10444.1. добаачяют
5.0 г пептона. 7.5 г глюкозы. 2,5 г натрия хлорида, составные части растворяют нагреванием. После
этого охлаждают и устанавливают pH таким образом, чтобы после стерилизации при 25 *С он
составлял 7.2 ±0,1. Затем основу среды стерилизуют текучим паром (при 100 *С) в течение 30 мин.
К основе среды, охлажденной до 50 ‘С, добавляют 2,0 см3натрия азида, приготовленного по п. 3.1.9,
и 2,0 см3 раствора бромкрезолового пурпурного, приготовленного по п. 3.1.8. Готовую среду не
стерилизуют. Среду хранят в защищенном от света и высыхания виде при (4 ± 2) "С не более 3 мес.
Непосредственно перед использованием ее разливают по 5 см3 в стерильные пробирки.
3.2.2. Глюкозо-триптонный бульон с дрожжевым экстрактом с pH 7,2 и 9.6:5.0 г триптона или
ферментативного казеинового гидролизата, 12,5 см3 дрожжевого экстракта, 1,0 г глюкозы добавляют
50