ГОСТ 28038-89 С. 3
раствора серной кислоты и доводят до метки раствором серной кислоты той же концентрации.
Содержимое колбы тщательно перемешивают. Остальные калибровочные растворы готовят точным
разведением первого раствора в 2 и в 4 раза раствором серной кислоты.
Определяют оптическую плотность каждого раствора в кювете с рабочей длиной I см на
спектрофотометре при длине волны 350 нм. В качестве контрольного раствора используют раствор
серной кислоты. По полученным значениям оптической плотности для каждого раствора вычисляют
значение молярною показателя поглощения (£’), дм3 моль-1 см-1, по формуле
D
г
с1
где D — оптическая плотность калибровочного раствора;
с — молярная концентрация лвухромовокислого калия в растворе, моль/дм’;
/ — рабочая длина кюветы, см.
По полученным значениям рассчитывают среднее значение малярного показателя поглощения
(Е ) и вычисляют поправочный коэффициент (К ) для спектрофотометра по формуле
где Ес —стандартизованное значение молярного показателя поглощения.
Ес = 3160 дм3•моль- 1•см* *.
(Введен дополнительно, Изм. № 2).
4.2. П р и г о т о в л е н и еп е р в о г ос т а н д а р т н о г ор а с т в о р а
В сосуд с патулином, содержащий около 5 мг препарата, вносят пипеткой 10 см3смеси бензола
с ацетонитрилом (9 ; 1). Содержимое сосуда аккуратно взбалтывают до полного растворения
кристаллов патулина и переносят в мерную колбу вместимостью 100 см3. Сосуд ополаскивают еще
двумя порциями по 10см3смеси бензола с ацетонитрилом (9 ; 1). каждый раз перенося
содержимое в ту же мерную колбу. Объем в колбе доводят до метки смесью бензола с
ацетонитрилом (9 : I), содержимое тщательно перемешивают. 20 см3 полученного раствора
переносят в другую мерную колбу такой же вместимости. Объем в колбе доводят до метки смесыо
бензала ацетонитрилом (9 ; I), содержимое тщательно перемешивают. Полученный первый
стандартный раствор хранят в холо дильнике в закрытом сосуде. Срок годности раствора
патулина — 6 мес.
Точную концентрацию патулина в первом стандартном растворе определяют спектрофотомет-
рическим методом. Для этого пипеткой 6.0 см3первого стандартного раствора переносят в отгонную
колбу. Раствор упаривают досуха на ротационном испарителе при температуре 35—40 °С. Сухой
остаток растворяют в 9,0 см3 этилового спирта и определяют оптическую плотность слоя раствора в
кювете с рабочей длиной I см по отношению к контрольному раствору на спектрофотометре при
длине волны 275 нм. В качестве контрольного раствора используют этиловый спирт.
Массовую концентрацию патулина в стандартном растворе (О, мкг/см3, вычисляют по
формуле
С
MDK
, А’,
-------
Т- —■■Ю3,
с/
где М — молярная масса патулина. Л/= 154 г/моль;
D —оптическая плотность раствора;
/Г, — коэффициент разведения, Kt = 1,5;
К2 — поправочный коэффициент к спектрофотометру, определенный по п. 4.1а;
е — молярный показатель поглощения раствора патулина при длине волны 275 нм.
е = 1,46 • 104дм3 моль-1 см-1 ;
/ —рабочая длина кюветы, см.
4.3.П р и г о т о в л е н и ев т о р о г ос т а н д а р т н о г ор а с т в о р а
Второй стандартный раствор патулина готовят точным разведением первого стандартного
раствора смесью бензола с ацетонитрилом (9 : I) в два раза.
4.2, 4.3. (Измененная редакция, Изм. № 2).
141