С в ГОСТ 25386— 91
»
50 %»
+
»
25 %
’ Контрольной служитсмесь 0,1 см’культурылептоснир
с СМ см5 физиологическою раствора. Лептоспиры в контрольном
варианте должны оставаться подвижными, нс иметьпризнаков
лизиса и агглютинации.
Реакцию учитывают микроскопией капельиз каждой лунки
в темном поле микроскопа при увеличении 20x10 или 40X7X1,5.
Капли из лунок наносят на предметное стекло бактериологиче
ской петлей от большего разведения к меньшему и просматри
вают нх без покровного стекла. Капли наносят двумя способами:
бактериологической петлейдиаметром 3 мм наносят на стекло
сразу до 30 капель и просматривают нхпод микроскопом; бак
териологической петлей диаметром 1 мм наносят на предметное
стекло в освещенный центр поля зрения одну каплю н просмат
ривают ее, передвигая столик на 2—3 мм, н рядом с первой на
носят и учитывают вторую каплю. Перед взятием каждого ново
го антигена петлю прокаливают н охлаждают.
Результаты реакции оценивают в крестах:
• -4-++ + — агглютинированы 100% лептоснир;
+ + +—
»
75 %»
+ +
—— агглютинация отсутствует.
»
Агглютинация проявляется м склеивании лептоснир и образо
вании паучков. Паучок включает от 3—5 до нескольких дсситков
и сотен лептоснир. Свободные концы лептоепнр сохраняют под
вижность
В начальных разведениях сыворотки может наблюдаться ли
зис лептоепнр, проявляющийся в набухании и прекращении дви
жения клеток, появлении зернистости и полного распада микроб
ных клеток.
2.1.1.4. О ц е н к аре з у л ь татов
Положительной считают РМЛ, оцененную на два креста и бо
лее при отсутствии агглютинации в контроле.
Наличие специфических антител в сыворотке крови животных
п т:.гре 1:50 у иевакншшрованных — 1:100 у вакцинированных и
выше свидетельствует об инфицировании данной особи лептоепк-
рами и возможном лсптоспироиосительстве.
РМА специфична в любом разведении, а наличие антителв
любом титре свидетельствует об унифицированни данной особи
лептоспирами и возможном лептоелнроиосительстпе.
По результатам серологическихисследований возбудителями
лсптоспироза считают лептоспиры той серологической группы, к
которой обнаружены антитела в наиболее высоком титре.
Необходимо учитывать, что п сыворотке крови свиней, лоша
дей. крупного и мелкого рогатого скота при исследовании в РМА
обнаруживают в 5—15 % случаев антитела в наиболее высоком