С. 26 ГОСТ 2S3N6—91
о гл церина).
почек, при остром течении -- из ткани почек и печени, У абор
тированного плодаготовят и исследуют суспензию из всех ор
ганов.Патологический материал должен быть взят и исследо
ван в течение 6 ч в летнее время и 10—12 ч при условии хра
нения его в охлажденном состоянии. Вероятность выделения леп-
тоспир в более поздние сроки снижается.
Кусочки исследуемого органа массой 2—3 г растирают в ступ
ке с 3—7 см3 питательной среды или физиологического раствора,
или стерильной водыдо получения гомогенной взвеси. Суспен
зию отстаивают в холодильнике 1—2 ч или центрифугируютв
течение 10 мин при 3000 об/мин и делают мазки из надосадоч-
ной жидкости.
Препараты из транссудата из грудной и брюшной полостей,
содержимого желудка плода и других жидких субстратов гото
вят по той же методике, что и из мочи. Препаратыиз культур
лептоспир готовят без предварительнойобработки путем нане
сения на стекло капли культуры.
Пробы воды дляисследованияцентрифугируютпри
8000—10000 об/мин в течение 30 мин, сливают надосадочиук»
жидкость, а осадок ресуспендируют в капле надосадочной жид
кости п наносят на предметное стекло.
Мазки высушивают при комнатной температуре, фиксируют
ацетоном 5 мин или этиловым спиртом 15 мин и снова высуши
вают на воздухе
Для окрашивания препаратыразмещают горизонтальнона
мостике. На каждый мазок наносят 3—5 капельразведенного
флуоресцирующегоглобулина, распределяют его по всейпо
верхности мазка и выдерживают его при комнатной температу
ре 20 мни. Для лучшего окрашивания препараты следует перио
дически покачивать. Затем глобулин сливают.
Препаратыпромывают водопроводной водойи физиологи
ческим раствором (pH = 7,4—7,6) по 5 мин, меняя за это время
раствор 4—5 раз. Затем препараты промывают в таком же по
рядке дистиллированной водой, воду стряхиваютн мазки под
сушивают на воздухе или используя обогреватель с вентилято
ром. После этого на мазок наносят небольшую каплюсмеси,
состоящей из 9 частей глицерина и 1 части 0,05 Мфосфатного
буфера (pH =8,0, накрываютпокровным стеклом, плотно при
жимают его к предметному стеклу, удаляя излишки забуфереи-
ног
Для
и
контроля готовят 2—3 мазка одного из диагностических
штаммов лептоспир и окрашивают их параллельно с мазками из
патологического материала.
Мазкипросматривают подлюминесцентныммикроскопом
или биологическим микроскопом.
Увеличение 7X90, сила тока 4.1 А. Микроскопируютчерез