С И ГОСТ 253Ьв-91
тичсскмх условиях, фильтруют, расфасовывают но пробиркам или
флаконам.
2.2.29 Приготовл ение с р е д ы Э л л им г а у з е н а
Для приготовления среды используют:
цинк сернокислый по ГОСТ 4174;
железо сернокислое по ГОСТ 4148;
воду деионизированную;
L-инстин;
раствор тиамина гидрохлорида — 0,2 %-ный раствор;
полнеорбаг—80;
витамин В|2;
альбумин сывороточный;
натрий фосфорнокислый однозамешенный по ГОСТ 245;
калий фосфорнокислый по ГОСТ 4198;
натрий хлористый но ГОСТ 4233;
аммоний хлористый по ГОСТ 3773;
медь сернокислую но ГОСТ 4165.
Готовят полную среду смешиванием 800 см* основной среды и
200 см3 буферного раствора альбумина сыворотки крови круп
ного рогатого скота.
Основную среду готовят следующимобразом.Смешивают
40 см3 фосфатного буфера, 50 см3солевогораствора,1 см1
0,03 %-ного раствора сульфата меди, 10 см3 0,04 %-ного раство ра
сульфата цинка, 0,05 см3 сульфатажелеза (FeS04X7H20)„
растворенного ы20—40 см3 деионизированной воды. 0.2 г цистина,
0.1 см3 0.2 %-ного раствора тиамина гидрохлорида, 1,2 см3 поли-
сорбата-80 (растворенного а 5—10 см3 воды), 0,2 см* раствора
витамина В,2 (1000 см3), доводят деионизированной водой
до 1000 см3.
После добавления L-цистина среду перемешивают20 мни,
дают отстояться 20 мин. Смесь очишаюг фильтрованием. Затем
добавляют остальные компоненты. Среду перемешивают, разли
вают в стеклянные контейнеры, автоклавируют.
Буферный раствор альбумина сыворотки крупного рогатого
скота готовят смешиванием 40 см3 фосфатного буфера и 50 г
альбуминасыворотки крови крупного рогатого скота,фрак
ция V в порошке (либо эквивалентное количество в стерильном
растворе),деионизированную воду добавляют до 1000 см3. Сте
рилизуют фильтрованием.
Растворы готовят следующим образом:
а) фосфатный буфер: натрий фосфорнокислый(Na2HP04) —
16.6 г, калий фосфорнокислый (КН2Р04) — 2,17 г смешивают, до
бавляют деионизированной воды до 1000 см3;
б) солевой раствор: хлорид натрия (NaCI): 36,0 г,хлорид
аммония (NH4CI) — 5,35 г, сульфат магния(MgS04X6H20) —
3,8 г, деионизированная вода — до 1000 см3;