ГОСТ Ю М -9» С. 5
При исследовании сыворотки, высушенной на фильтровальной
бумаге, вырезают одну или две капли (0,05 или 0,1 см1) сыворот
ки, измельчают ножницами и заливают в пробирке физиологиче
ским раствором в объеме 2,45 или 4,9 см’, экстрагируют в течение
1 ч ори температуре (37 ± 1) °С.
•Полученный экстракт используют как исходное разведение сы
воротки 1:25 или 1:50.
Сыворотку крови животных при ввозе их в хозяйство и вывозе
из него для племенных целей и целей воспроизводства разводят
1:25 и исследуют только в одном разведении (после добавления
антигена разведение сыворотки будет соответствовать 1:50).
При изучении этиологической структуры и обследовании им
портируемого скота реакцию ставят со всемиприведенными в
таблице антигенами, при обследовании животных в хозяйствах с
известной этнологией и при перевозках внутри страны реакцию
ставят с антигенами 4—7 серогрупп (Pomona, Tarassovi, Canicola,
Hcbdomadis, Sejroe, Grippotyphosa, Icierohaemorrltagiae).
Диагностические штаммы лептоспир лаборатории получают
во Всесоюзном государственном научно-контрольноминституте
ветеринарных препаратов не реже одного раза в год.
Пригодность культуры для использования в реакцииоцени
вают просмотром в проходящем свете и мик|росколией. При дос
таточном накоплении лептоспир послевстряхивания пробирки с
культурой в среде в проходящем свете хорошо заметны муаро
вые волны, а в спокойном состоянии наблюдается легкая опалес
ценция. Наличие осадка, пленки, помутнения среды свидетельст
вует о прорастании посторонней микрофлоры, полная прозрач
ность среды — об отсутствии роста лептоспир.
В реакции используют чистые культуры лептоспир в возрасте
5—15 сут без признаков агглютинации и лизиса снакоплением
70—100 микробных клеток в поле зрения микроскопа при увели
чении 40х 1,5X7 или 40X7—10.
Через каждые 3 мес лаборатории контролируют диагностиче
ские штаммы лептоспир в реакции микроагглютинации (РМА) с
групповыми агглютинирующими сыворотками.
2.1.1.3. П р о в е д е н и еи с с л е д о в а н и я
Для постановки РМА разведенную сыворотку разливают мер
ной пипеткой или аппаратом Флоринского, начиная с большего
разведения, в лунки агглютинационных пластинили пробирки
но 0.1 см5в каждую.
Сыворотку из каждого разведения разливают в отдельный ряд,
состоящий из 4—23 лунок (пробирок) в зависимости от количест ва
антигенов, используемых в реакции. Каждую культуру-антиген
вносят по 0.1 см1 в 1—3 лунки в зависимости от количества раз-
ведений сыворотки. После добавления антигенов пластины встря
хивают и выдерживают в термостате при 30- 37 °С в течение 1 ч.