ГОСТ Р 51228-98
5 Реактивы
Все реактивы должны быть квалификации чистый для анализа ч.д.а. Используют дистиллиро
ванную воду или воду, соответствующую по чистоте дистиллированной.
5.1 Йод, о с н о в н о йр а с т в о р
Растворяют 11.0 г йодистого калия в минимальном количестве воды и добавляют 5,50 г крис
таллов йода. Перемешивают до полного растворения йода и разбавляют до (250+0,5) см1. Хранят
раствор в темноте в склянке из коричневого стекла. Срок хранения раствора 1 мес.
5.2 Йод,р а з б а в л е н н ы йр а с т в о р
Растворяют 40.0 мг йодистого калия в воде, добавляют 4.00 см3 основного раствора (5.1) и
разбавляют до (1000±1) см3. Раствор следует готовить вдень использования.
5.3 Б у ф е р н ы йр а с т в о р
Растворяют 120 см3ледяной уксусной кислоты и 164 г безводного уксуснокислого натрия или
272 г тригидрата уксуснокислого натрия (CH,COONa ЗН.О) в воде и разбавляют до (1000±1) см3.
5.4 Х л о р и с т ы йк а л ь ц и й , р а с т в о р 2 г/дм1
Растворяют 2,0 г безводного хлористого кальция или 2.6 г дигидрата хлористого кальция
(СаС1; 2Н,0), или 3.9 г гексагидрата хлористого кальция (СаС1, • 6Н,0) в воде и разбавляют до
(1000±1) см3.
5.5 Р а с т в о рк о н е ч н о г од е к с т р и н а
Используют растворимый крахмал Линтнера, специально предназначенный для определения
анастатической активности1). Его влажность определяют в соответствии с ГОСТ 7698 (метод 1).
Используют специальный порошок зерновой бета-амилазы, свободный от альфа-амилазы2)
Навеску крахмала массой 10,00 г сухого вещества суспендируют 20,0 см’ воды. Приготовлен
ную суспензию медленно, при помешивании, выливают в химический стакан с 300 см’ кипящей
воды. Для лозного перенесения крахмала его смывают с помощью промывалкн. Раствор медленно
кипятят в течение 2 мин при помешивании и затем охлаждают в проточной воде до темперазуры не
выше 30 *С. Химический стакан с раствором крахмала покрывают часовым стеклом во избежание
образования пленки на поверхности раствора крахмала. Затем добавляют 25 см3буферного раствора
(5.3) и 250 мг бета-амилазы, растворенной приблизительно в 5 см3 воды.
Объем доводят водой до 500 см3, добавляют несколько капель толуола и весь раствор переме
шивают.
pH раствора должен составлять (4,7±0,1). Если pH находится вне этих пределов, раствор
аннулируют.
Прежде чем раствор используют в качестве субстрата он должен быть выдержан при комнатной
температуре не менее 20 ч. Раствор следует хранить не более 5 дней при температуре не выше 25 *С.
6 Аппаратура
Используется обычная лабораторная аппаратура, стеклянные изделия и, кроме того:
6.1 Водяная баня с постоянной температурой, отрегулированной на (30,0±(),1) *С.
6.2 Водяная баня с постоянной температурой, отрегулированной на (20,0±0,5) ‘С.
6.3 Спектрофотометр, способный работать при длине волны 575 нм, или колориметр, снаб
женный желтым фильтром длиной волны максимального пропускания около 575 нм и соответст
вующей полушириной полосы, с логарифмической шкалой для измерения значения поглощения
света (оптической плотности).
6.4 Секундомер с секундной стрелкой.
"Могут быть использованы следующие крахмалы Линтнера. эквивалентные прежнему № 09903 каталога
Merck and Со., N.V., США
—J.T. Baker Chemical Со. Филлипсбург, США. каталог. № 5995120
—BDH Chemicals Ltd. Пул. Великобритания, каталог, № 30260
—Е.Merck. Дармштадт, ФРГ, каталог. № 1252.
"Используютбета-амилазу фирмы Wallerstcin Со., Штатсн-Айлснд 3. N.V., США. или вещество эквива
лентного качества.