ГОСТ 34104—2017
4) раствор для отмывки No 2 для очистки от солей, содержащий водный раствор изопропилового
спирта;
5) сорбент(25%-наявзвесьчастицсиликагеляSi02размеромот20до 50 мкм враствореТрис-HCI
молярной концентрации 5 ммоль/дм3);
6) буфердля элюцииДНК (ТЕ-буфер) — Трис-HCI молярной концентрации 10 ммоль/дм3;натрие
вая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты молярной концентрации 1ммоль/дм3;
б) вода деионизированная, класса чистоты I. свободная от рибоиуклеаз. дезоксирибонуклеаз,
неорганическихи органических примесей с удельным сопротивлением не менее 18 Мом ■см;
в) ПЦР-буферсМдС12:
г) смесь олигонуклеотидов (праймеры) по5.3.2 или 5.3.3;
д) смесь олигонуклеотидов (зонды, меченные флуоресцентными красителями FAM и R6G) по
5.3.2 или 5.3.3;
е) раствор дезоксинуклеозидтрифосфатов (дНТФ). содержащий натриевые соли дНТФ со сте
пенью очистки более 98 % иконцентрацией каждой 2 моль/дм3;
ж) термостабильная Taq-полимераза;
и) сертифицированные стандартные образцы ГМ линий сои. ГМ линий кукурузы или ГМ линий
рапса*.
Допускается использование других реагентов с техническими характеристиками не хуже указан
ных.
5.3.2 Для выявления фрагментов видоспецифичной ДНК растений допускается использование
наборов реагентов (готовых тест-систем), содержащих праймеры, специфичные к ДНК определенного
вида растений.
5.3.3 Допускается использование синтезированных олигонуклеотидных праймеров и зондов для
идентификации ГМ линий сои. кукурузы и рапса. Списокпоследовательностей всех используемых оли
гонуклеотидов приведен в таблицах 1—3. где указаны последовательности:
1) для прямых иобратныхпраймеров и зондов**, специфичныхконкретной ГМлинии;
2) прямыхиобратныхпраймеровизондов, специфичныхфрагментугеномарастения(ген лектина
для сои, ген зеинадля кукурузы, ген круциферина Адля рапса).
Т а б л и ц а ! — Последовательности олигонуклеотидных праймеров и зондов для идентификации ГМ линий сои
Л
иния ГМ сои
Последовательность
Наименование
5’-3’ последовательность
40-3-2
Целевая
40-3-2F
GCCATGTTGTTAATTTGTGCCAT
40-3-2R
GAAGTTCATTTCATTTGGAGAGGAC
40-3-2Р
FAM-CTTGAAAGATCTGCTAGAGTCAGCTTGTCAGC
G-BHQ1
Растительная
Lec40-3-2F
TCCACCCCCATCCACATTT
Lec40-3-2R
GGCATAGAAGGTGAAGTTGAAGGA
Lec40-3-2P
R6G-AACCGGTAGCGTTGCCAGCTTCG-8HQ1
А5547-127
Целевая
A5547F
GCTATTTGGTGGCATTTTTCCA
A5547R
CACTGCGGCCAACTTACTTCT
А5547Р
FAM-CCGCAATGTCATACCGTCATCGTTGT-BHOI
Растительная
LecA5547F
CTTTCTCGCACCAATTGACA
LecA5547R
TCAAACTCAACAGCGACGAC
L6CA5547P
R6G-CCACAAACACATGCAGGTTATCTTGG-BHQ1
* Сертифицированные стандартные образцы производства IRMM.
Бельгия;
AOCS.
США (материалы,
состоящие из высушенной гомогенизированной муки соевых бобов, рапса или кукурузы, включающих смеси ГМ и не
ГМ растений соответствующих видов, содержащие от 0.1 % до 100 % генетически модифицированных материа
лов). Данная информация является рекомендуемой и приведена для удобства пользователей настоящего стан
дарта.^
Маркировки в наименовании. «Р» — прямой праймер. «R* — обратный праймер. «Р® — зонд.
4