ГОСТ 33951—2016
Для определения
L. casei
или
L. rhamnosus
в смешанной культуре с молочнокислыми палочками
берут три чашки Петри с заранее подсушенной в термостате в течение 30 мин питательной средой (6.2.8). 1
см3каждого разведения продукта наносят на поверхность среды и тщательно растирают шпателем
Дригальсхого по поверхности. Чашки Петри переворачивают дном вверх и помещают в термостат.
8.2.2.3 Выращивание
Чашки с посевами инкубируют в течение 72 ч при:
- температуре (30 ± 1) еС для подсчета мозофильных молочнокислых бактерий;
- температуре (37 ± 1) СС для подсчета термофильных молочнокислых бактерий;
- температуре (37 ± 1) °Сдля совместного подсчета мезофильных итермофильных молочнокислых
бактерий.
При определении количества
L. bulgaricus
и S.
thermophilus
в образцах йогурта чашки с посевами
для подсчета
L. bulgaricus
термостатируют при температуре (37 ± 1) °С в течение 72 ч в анаэробных
условиях. S.
thermophilus
— при температуре (37 ± 1) °С в течение 48 ч.
При определении
L. casei
или
L. rhamnosus
чашки с посевами термостатируют при температуре
(30 ± 1) "С в течение (72 ± 3) ч.
8.2.3 Обработка результатов
По окончании инкубации подсчитывают количество характерных колоний на чашке Петри. Если
колонии имеют гетерогенный вид. делают микроскопические препараты нескольких колоний для
подтверждения их принадлежности к конкретному виду:
-
L. delbruecki subsp. bulgaricus
образует чечевицеобразные с четко очерченными краями колонии
диаметром (1 — 3) мм на среде по 6.2.6;
- S.
thermophilus
образует чечевицеобразные колонии диаметром (1— 2) мм на среде по 6.2.5;
- лактококки - образуют на поверхности питательной среды мелкие колонии диаметром до 1 мм.
круглые, светлые; глубинные — чечевицеобразные;
-
L casei
или
L. rhamnosus
образуют мелкие круглые колонии наповерхности плотных питательных
сред и вогнутые, иногда с выростами глубинные колонии по 6.2.8.
Для подтверждения результатов выбирают использованные при подсчете колонии и готовят ми
кроскопический препарат по ГОСТ 32901 (8.7).
Характеристика микролрепарата
L. delbruecki subsp. bulgaricus
— палочки одиночные и в парах,
цепочки палочек;
Характеристика микропрепарата S.
thermophilus-
кокки, диплококк, длинные цепочки кокков;
Характеристика микропрепарата
L. casei
или
L. rhamnosus
— мелкие тонкие палочки.
Количество микроорганизмов каждого вцда
N
определяют по формуле:
(л, ♦ 0,1 •л2) ■
d ’
где
N
— количество микроорганизмов каждого вида в пробе. КОЕ/г;
С — сумма колоний, подсчитанных на чашках;
л, — количество чашек, соответствующих определяемому микроорганизму, подсчитанных в самом
низком разведении;
л2 — количество чашек, соответствующих, определяемому микроорганизму, подсчитанных в самом
высоком разведении;
d
— число, соответствующее значению разведения для каждого вида микроорганизмов, для которого
был произведен первый подсчет.
Общее количество молочнокислыхбактерий в йогурте определяют путем суммирования количества
L. bulgaricus
и S.
thermophilus.
Пример
—
Если
в
10
м5
разведении 295 и 245 колоний L. bulgaricus и в 1<ГЪразведении 33 и 40 колоний
L. bulgaricus, то N1
=
(295*245+33+40)/[(2+0.1-2) ■10~5] = 278,6-10
5;
если в 1<Г5разведении 280 и 240 колоний
S. thermophilus и в 1V6разведении 30 и 38 колоний S. thermophilus. то Ы2- (280+240+30+38)/[(2+0,1-2)-Шс] =
=
267,3-10с; общее количество молочнокислых бактерий N
=
N,+ N2
=
278,6 10s + 267,3-10е
=
295,2 10s
=
=
3,0-10
8
КОЕ/см3.
7