ГОСТ 33951—2016
pH составил (6.9 ± 0,1). Сроду разливают по 90 см3в колбы вместимостью 250 см3и стерилизуют при
температуре (121 ± 1) °С в течение (15 ♦ 1) мим.
Питательную среду допускается хранить в темном месте при температуре (4 ± 2) вС в течение
30 дней. Перед использованием среду расплавляют на водяной бане и вносят в нее 10 см320%-ного
раствора мальтозы (6.3.2).
6.3 Приготовление реактивов
6.3.1 Приготовление раствора лактозы
Для приготовления 10 %-ного раствора лактозы 10 глактозы вносят в мерную колбу вместимостью
100 см3, доводят объем до метки дистиллированной водой, растворяют, разливают в пробирки по 5 см3
и стерилизуют при температуре (121 ± 1) °С в течение 15 мин.
6.3.2 Приготовление раствора мальтозы
Для приготовления 20 %-ного раствора мальтозы 20 г мальтозы вносят в мерную колбу вместимостью
100 см3,доводят объем до метки дистиллированной водой, растворяют, разливают в пробирки по 10 см3
и стерилизуют при температуре (121 ± 1) °С в течение 15 мин.
7 Условия проведения анализа
При выполнении анализа в лаборатории должны соблюдаться следующие условия:
температура окружающего воздуха...................(20 ± 5) °С;
относительная влажность воздуха.....................от 30 % до 80 %;
атмосферное давление.......................................от 84 кПа до 106 кПа.
8 Методы анализа
Для определения количества лактококков и термофильных молочнокислых стрептококков посев
проводят в жидкую питательную среду по 6.2.1 или агаризованные питательные среды по пп. 6.2.3 — 6.2.5.
Для определения количества молочнокислых палочек посев проводят в жидкую среду по 6.2.1 или
6.2.6, 6.2.7.
Для определения количества
L. casei (L.caseisubsp.casei
или
L.casei subsp. rhamnosus)
в смешан
ных культурах с молочнокислыми палочками посев проводят в среду по 6.2.8.
8.1 Метод определения молочнокислых бактерий посевом в стерильное молоко
и подсчета НВЧ
8.1.1 Сущность метода
Метод основан на способности мезофильных молочнокислых бактерий развиваться в обезжирен
ном молоке при температуре (30 ± 1) °С, а термофильных молочнокислых бактерий — при температуре
(37 ± 1) вС, сбраживая лактозу до молочной кислоты и образуя сгусток в течение 72 ч.
8.1.2 Проведение анализа
8.1.2.1 Выбор разведений для посева
Количество засеваемого продукта устанавливают с учетом наиболее вероятного содержания этих
микроорганизмов в продукте. Как правило, для подсчета палочек используют пятое, шестое или седьмое
разведение. Для подсчета стрептококков — седьмое или восьмое разведение.
8.1.2.2 Посев
Из каждой пробы делают ряд последовательных разведений (до 10). По 1 см3 последних трех
четырех разведений вносят в две параллельные пробирки со стерильным обезжиренным молоком и
помещают в термостат.
8.1.2.3 Культивирование
Термостатирование чашек Петри осуществляют при температуре (37 ± 1) °С в течение (72 ♦ 3) ч
в анаэробных условиях.
Термостатирование пробирок осуществляют при температуре (37 ± 1) вС в течение (72 ± 3) ч в
аэробных условиях.
Пробирки с посевами инкубируют в течение 72 ч при:
- температуре (30 ± 1) “Сдля подсчета мезофильных молочнокислых бактерий:
- температуре (37 ± 1) °С для подсчета термофильных молочнокислых бактерий;
- температуре (37 ± 1) °С для совместного подсчета мезофильных итермофильных молочнокислых
бактерий.
5