ГОСТ ISO 16649-1—2015
6.11 Чашки Петри, диаметром приблизительно 90 мм.
6.12 Шпатели изстекла или пластика: например изогнутыестеклянные палочкидиаметром 3.5 мм
идлиной 20 см с изгибом подпрямым углом нарасстояниипримерно3 смотодного края исотрезанными
концами, запаянные посредством нагревания.
7 Отбор проб
Очень важно, чтобы лаборатория получила представительную, не поврежденную, и не изменен
ную во время транспортировки или хранения пробу.
Отбор проб не является частью метода, описанного в настоящем стандарте. Если соответствую
щий стандартотсутствует, рекомендуется, чтобы заинтересованные стороны пришли копределенному
соглашению поданному вопросу.
8 Подготовка анализируемой пробы
Подготавливают анализируемую пробу в соответствии со стандартом, подходящим для рассмат
риваемого продукта. Если соответствующий стандарт отсутствует, рекомендуется, чтобы заинтересо
ванные стороны пришлик определенномусоглашению поданному вопросу.
9 Методика
9.1 Исследуемая часть пробы, исходная суспензия и разведения
См. ISO 6887-1 илюбойсоответствующийстандарт, подходящийдлярассматриваемогопродукта.
9.2 Восстановление
9.2.1 В асептических условиях, используя стерильные щипцы (6.6). помещают мембрану (6.5) на
сухую поверхность питательной среды MMGA каждой из двух подготовленных чашек Петри (соглас но
5.2.1.3), принимая меры по предотвращению образования пузырьков воздуха под мембранами. При
необходимости аккуратно разглаживают мембраны стерильным шпателем (6.12).
Используястерильную пипетку (6.8). добавляют 1см3исследуемой пробыили исходнойсуспензии
в центр каждой мембраны. Используя стерильный шпатель, равномерно распределяют инокулят по
всей поверхности мембраны, избегаяутечки заее пределы.
9.2.2 При необходимости повторяют процедуру, какописано в 9.2.1. с последующимидесятичны
ми разведениями, используя другую стерильную пипетку и другой стерильный шпатель для каждого
разведения.
9.2.3 Оставляют засеянныечашки Петри в горизонтальном положении при комнатной температу
ре приблизительно на 15 мин. пока инокулят непросочится через мембрану в агар. Инкубируютчашки с
посевами в течение (411) ч в инкубаторе (6.2) при температуре (37 ± 1) вС в таком положении, чтобы
поверхность мембраны/агара находилась сверху.
9.3 Перемещение на селективную среду и инкубация
9.3.1 После восстановления, используя стерильные щипцы (6.6), переместить мембраны со
среды MMGA (среда для восстановления) на чашки Петри со средой ТВХ (5.2.2.3).
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ — Влажная мембрана прилипает к поверхности агара. Избегайте
образования пузырьков воздуха. Не используйте шпатель.
9.3.2 Инкубируютчашки Петри втечение 18—24ч в инкубаторе(6.2), притемпературе(44 А1)вС.в
таком положении, чтобы поверхность мембраныУагара находилась сверху. Не укладыватьдруг на друга
более трех чашек.
9.4 Подсчет колоний (КОЕ)
После заданного периода инкубации (9.3.2) подсчитывают колонии (КОЕ) бета-глюкуронида-
за-положительных Escherichia coli в каждой чашке, содержащей менее 150 типичных колоний (КОЕ) и
менее 300 общих (типичных инетипичных) колоний (КОЕ).
Чашки, несодержащиетипичныхколоний (КОЕ), должны бытьучтены при вычислениях, приведен
ных в пункте 10.
4