ГОСТ ISO 16649-1—2015
5.2.1.2 Подготовка
Растворить хлорид аммония в воде. Добавитьдругие компоненты инагретьдо кипения. При необ
ходимости отрегулировать pH таким образом, чтобы после стерилизации он составлял (6.7 ± 0,2) при
температуре25 °С. Разлитьпо500см3в подходящиефлаконы (6.10). Провестистерилизацию в автокла
ве (6.1) при температуре 115 °С в течение 10 мин.
5.2.1.3 Подготовка чашек Петри сагаром
Вливают 12—15см3среды в стерильныечашки Петри(6.11)идаютзастыть. Подсушиваютчашкис
агаром (см. ISO 7218). Чашки можно хранитьпри температуре (3 ± 2) °С в течение пяти дней.
Поверхность агара должна быть достаточно сухой, чтобы позволить излишней влаге исчезнуть
в течение 15 мин после распределения инокулята (1 см3).
Селективная среда: среда с триптоном, солями желчных кислот и Х-глюкуронидом
5.2.2
(ТВХ)
5.2.2.1
Состав
Ферментативный гидролизат казеина
Соли желчных кислот № 3
5-Бром-4-хлор-3-индолил-бета-0-глюкуроновая кислота (BCIG)
Диметилсульфоксид (DMSO)b|
Агар
Вода
20.0 г
1,5 г
144 мкмоль31
3 см3
от 9 до 18 г*1
1000 см3
*’ Например. 0.075 г соли циклогексиламмония.
Диметилсульфоксид вреден при вдыхании и контакте. При работе с ним рекомендуется использовать
вытяжной шкаф. В виду токсичности можно использовать рекомендованный изготовителем разбавитель.
‘ В зависимости от прочности агарового геля.
П р и м е ч а н и е — Используемые реактивы должны быть признанного аналитического качества и пригод-
ными для микробиологических исследований.
5.2.2.2 Подготовка
Растворяют BCIG в диметилсульфоксиде или в рекомендованном изготовителем разбавителе.
Растворяют все компоненты в воде и нагреваютдо кипения.
При необходимости отрегулировать pH таким образом, чтобы после стерилизации он составлял
(7.2 ± 0.2)при температуре25 еС. Разливают по500 см3 в подходящие флаконы (6.10). Проводят стери
лизацию в автоклаве (6.1). при температуре 121 °С в течение 15 мин.
5.2.2.3 Подготовка чашекПетри
Производятдействия, приведенные в 5.2.1.3.
6 Оборудование и стеклянная посуда
Обычное микробиологическое лабораторное оборудование (см. ISO 7218).
6.1 Устройство для суховоздушной стерилизации (сухожаровой шкаф) или стерилизации паром
(автоклав).
6.2 Инкубаторы, способные поддерживатьтемпературу (37 ± 1) °С и (44 ± 1)°С.
6.3 Шкаф сушильный или вентилируемая лечь, способные поддерживать температуру от
(25 ± 1)°С до (50 ± 1)вС. или ламинарный шкаф с потоком воздуха.
6.4 Холодильник (дляхранения готовых сред), способный поддерживатьтемпературу (3 ± 2) °С.
6.5 Мембраны стерильные и неингибирующие, произведенные из ацетилцеллюлозы или сме
шанных эфиров целлюлозы, с размером порот0,45до 1,2 мкм идиаметром 85 мм.
6.6 Щипцы тупоконечные, стерильные, длиной приблизительно 12 см.
6.7 pH-метр, способный проводить измерения с точностьюдо ±0,1 ед. pH.
Минимальный порог измерения должен составлять 0,01 ед. pH. pH-метр должен быть оснащен
устройством либо ручного, либо автоматического выравнивания температуры.
6.8 Пипетки с одной меткой (выдувные), номинальной вместимостью 1 см3, с ценой деления
0,1 см3.
6.9 Цилиндры мерные необходимой вместимостидля приготовления сред.
6.10 Пробирки, бутылки или колбы необходимой вместимости для стерилизации и хранения
питательных сред.
3