ГОСТ ISO 16649-1—2015
3.2подсчетбота-глюкуронидаза-положительныхEscherichiacoll(enumerationof
(Vglucuronidase-positive Escherichia coll): Определение количества колониеобразующих единиц (КОЕ)
бета-глюкуронидаза-положительныхEscherichia coliна кубический сантиметр илиграмм образца, когда
испытание и вычисления проводятся в соответствии с настоящим стандартом.
4 Сущность метода
4.1 Заданное количество исследуемогообразца или исходной суспензии засевают на целлюлоз
ные мембраны, выложенные на модифицированном минеральном агаре с глутаматом натрия (MMGA),
и затем инкубируютпри (37 ± 1) °С в течение 4 ч.
При таких же условиях, используя десятичные разведения исследуемого образца или исходной
суспензии, засеваютподве чашки Петридля каждого разведения.
4.2 Для получения изолированных колоний микроорганизмов, мембраны после стадии восста
новления на MMGA агаре переносят на агар с триптоном. солями желчных кислот и Х-глюкуронидом
(ТВХ), а затем инкубируютпри температуре (44 ± 1) °С в течение 18—24 ч.
4.3 Количествоколониеобразующихединиц(КОЕ)бета-глюкуронидаза-положительных
Escherichia coliна грамм или кубический сантиметр образца вычисляют исходя из количества типичных
колоний (КОЕ) (см. пункт 10).
5 Разбавитель и питательная среда
См. действующую лабораторную практику в ISO 7218.
5.1 Разбавитель
См. ISO 6887-1 или соответствующий стандарт, касающийся исследуемогопродукта.
5.2 Питательная среда
5.2.1 Среда для восстановления: модифицированный минеральный агар с глутаматом натрия
(MMGA).
5.2.1.1 Состав
Глутамат натрия
Лактоза
Формиат натрия
1.-(-)-Цистин
1.-(-)-Аспарагиновая кислота
Ь(+)-Аргинин
Тиамин
Никотиновая кислота
Пантотеновая кислота
Гептагидрат сульфата магния (MgS04 •7Н?0)
Железоаммониевый (III) цитрат3*
Дигидрат кальция хлорид (СаС1г 2НгО)
Калий фосфорнокислый двузамещенный (К2НР04)
Хлорид аммония
Агар
6.35 г
10.0 г
0.25 г
0.02 г
0.02 г
0.024 г
0.001 г
0.001 г
0.001 г
0,100 г
0.010 г
0.010 г
0.900 г
2.5 г
от 9 до 18 г*’
Вода
1000 см3
Содержание железа не менее
15
% (массовая доля).
ь*В
зависимости от прочности агарового геля.
Приме ч а ние — Используемые реактивы должны бытьпризнанного аналитического качества и пригод
ными для микробиологических исследований.
2