ГОСТ 33808—2016
9 Проведение анализа
9.1 Условия проведения и выполнение анализа
9.1.1 Условия проведения анализа
Условия проведения анализа подбирают в зависимости от вида применяемого жидкостного хро
матографа и хроматографической колонки.
Например, для жидкостного хроматографа с обращено-фазной хроматографической колонкой
С18 4,6 х 150 мм, 5 мкм применяют следующие хроматографические условия:
элюирование проводят в изократических условиях в течение 15 мин;
состав элюента: фосфатный буфер (pH = 6,0 ед. pH);
скорость подачи элюента — 0,8 см3/мин;
температура колонки — 30 °С;
длина волны детектирования — 210 нм.
(Измененная редакция, Изм. № 1).
9.1.2 Выполнение анализа
0,02 см3 экстракта анализируемой пробы вводят в подготовленный к работе жидкостный хрома
тограф.
9.2 Идентификацию пиков хроматограммы анализируемой пробы проводят сравнением с хро
матограммой градуировочного раствора по двум параметрам: времени удерживания и спектральному
отношению
R
(отношение высот хроматографического пика на разных длинах волн — 210, 254, 280,
320, 365 нм).
9.3 Если время удерживания и спектральные отношения пиков хроматограммы анализируемой
пробы совпадают в пределах допускаемых отклонений
(AR
< 0,05,
AtR
< 3 %) с временем удержива ния
и спектральными отношениями соответствующих им пиков хроматограммы градуировочного рас твора,
результат идентификации считают положительным.
9.4 Если спектральные отношения совпадают в пределах допускаемого отклонения, а разница
времени удерживания пиков хроматограммы анализируемой пробы и хроматограммы градуировочного
раствора больше допускаемого отклонения, проводят хроматографический анализ соответствующего
градуировочного раствора по 9.1 и сравнивают время удерживания. В случае совпадения в качестве
образца используют новую хроматограмму.
В случае повторного несовпадения времени удерживания используют метод добавок, для чего к
анализируемой пробе добавляют лимонную кислоту с массовой долей, сравнимой с массовой долей
«сомнительных» пиков, и анализируют по 9.1.
Если на хроматограмме пробы с добавкой площади «сомнительных» пиков увеличились на вели
чину, соответствующую величине добавки, то эти пики относятся к определяемым компонентам.
Если на хроматограмме пробы с добавкой наряду с «сомнительными» пиками присутствуют пики,
время удерживания и спектральные отношения которых совпадают с соответствующими параметрами
добавленных веществ, то сомнительные пики не относятся к определяемым компонентам.
9.5 Если время удерживания соответствующих пиков хроматограммы анализируемого раствора и
хроматограммы градуировочного раствора совпадает в пределах допускаемого отклонения, а разница
спектральных отношений больше допускаемого отклонения, настоящий метод не применим к данной
пробе.
9.6 Массовая доля лимонной кислоты и ее солей в анализируемой пробе не должна превышать
предельных значений массовой доли градуировочных растворов.
В случае превышения анализируемую пробу, содержащую лимонную кислоту и ее соли, с помо
щью автоматического дозатора разбавляют дистиллированной водой и проводят хроматографический
анализ разбавленных растворов.
Если массовая концентрация лимонной кислоты и ее солей в анализируемой пробе ниже пре
дельного значения градуировочного раствора, необходимо увеличить массу пробы, но не более чем в
два раза.
10 Обработка результатов
10.1В соответствии с данными, полученными при анализе градуировочных растворов, создают
таблицу пиков с использованием программного обеспечения хроматографа. Расчеты площади пиков и
массовой доли лимонной кислоты выполняются системой обработки данных в автоматическом режиме.
5