ГОСТ ISO 13366-2—2014
b)Добавляют требуемоеколичество соответствующей суспензиилейкоцитов вразличные образ
цы смесидля получения соответствующегодиапазона числа клеток.
6.1.2.2 Подготовка путем микрофильтрации
a) Отбираютсвежее сборное молоко и добавляют бронопол. доводядо концентрации 0.02 %.
b
) Обезжиривают молоко на сепараторе-сливкоотделителе до массовойдоли жира менее 0.1 %.
c) Концентрируют обезжиренное молоко в 20 раз. используя тангенциальную микрофильтрацию
через мембранус размером пор 0.8 мкм. получая в результате образец с высоким содержанием клеток
{НСМ) иобразец с низким содержанием клеток(LCM).
d) Смешиваютсливки HCMw LCMвпропорциях, обеспечивающихполучение5—8 образцовмоло
ка с массовойдолейжира 3.5 % и различным содержанием клеток, охватывающим нужный интервал.
6.1.2.3 Подготовка центрифугированием
a) Отбираютсвежее сборное молоко и добавляютбронопол. доводядо концентрации 0,02 %.
b
) Фильтруют приготовленное таким образом молоко через металлический фильтр с размером
пор 0,5 мм.
c) Обезжиривают профильтрованное молоко центрифугированием при радиальном ускорении
40 д в течение 10мин до получения сливок, обезжиренного молока иосадка.
d) Смешивают обезжиренное молоко и осадок в пропорциях, обеспечивающих получение
5—8 образцов молока с различным количеством клеток, которыеохватывают нужныйдиапазон.
e) При необходимости нормализуют сливками до достижения в образце массовой доли жира
(3.310.3) %.
0 Полученные образцы разделяют наотдельные пробы инагреваютихпри 120 °Си 105Па в тече
ние 3 мин.
6.1.3 Задание стандартных значений
Стандартные значения определяют параллельными анализами с использованием контрольного
метода, установленного в ISO 13366-1. Целесообразно проводить испытания не менее чем в двух раз
личных лабораториях.
С целью устранения случайных отклонений при подсчете уровня содержания клеток с течением
времени рекомендуется проводить параллельный анализ образцов для калибровки с использованием
инструментального метода, точно калиброванного с помощью действующего предыдущего набора
образцов для калибровки.
Какправило, приемлемое соотношениес учетом максимальной разницы между результатами кон
трольного метода и подсчетами с помощьюприборадля отдельных образцовдля калибровкисоставля
ет менее 10 %. В таких случаях значения, полученные контрольным методом, и подсчеты с помощью
прибора можно соединить, в силу чего результат, полученный контрольным методом, должен быть
включен в заданноестандартное значение с весовым коэффициентом по меньшей мере 0.5.
При использовании результатов подсчета в анализируемых образцах для проверки на соответ
ствие официально установленным нормам методика установления стандартныхзначенийдолжна быть
утверждена компетентными органами.
6.1.4 Условия хранения и срок годности при хранении
Условияхранения исрокгодностиприготовленныхстандартныхобразцовдолжны пройтисоответ
ствующее подтверждение. Какправило, минимальный срок годности — один месяц.
Химическую консервацию проводят в соответствии с типом и концентрацией используемого кон
серванта для проб (см. 5.3).
6.2 Процедура калибровки
6.2.1 Калибровка
Передначалом калибровки необходимо убедиться в исправности прибора иего соответствии тре
бованиям относительно контроля холостых проб (см. 9.1). остаточного воздействия (см. 9.2), объемной
доли (см. 9.3) и сходимости (см. 9.6).
Допускается при калибровке использовать линейную регрессию.
Процедуру калибровки проводят в соответствии с ISO 8196-2 с использованием не менее пяти
образцов для калибровки, охватывающихсоответствующийдиапазон концентраций соматических кле
ток.
Предварительныезначениядлясоответствующихдиапазонов концентрацийсоматическихклеток
образцов для калибровки приведены в таблице 1.
5