ГОСТ ISO 13366-2—2014
3.2соматические клетки (somatic cells): Клетки, интенсивность флуоресценции которых при
окрашивании ДНК в ядрах превышает пороговую.
П р и м е ч а н и е — Выражается количеством соматических клеток в см3.
4 Сущность метода
Флуороопто-электронные счетчики имеютсистемы ввода реагентов и пробы для анализа, секцию
смешивания и секцию подсчета. В секции смешивания анализируемую пробу смешивают с буферной
смесью иокрашивающим раствором. Частьполученнойсмеси перемещаютвсекцию подсчетаинаносят
на предметную плоскость. Каждая окрашенная частица, обнаруживаемая вфлуоресцентном микроско
пе. испускает электрический импульс, который фильтруется, усиливается и регистрируется. Распреде
ление по высоте результирующего импульса обрабатывается электронным способом, посредством
чего происходит разграничение междушумовыми сигналами и импульсами, которые испускаются окра
шенными соматическими клетками. Уровень амплитудного селектора импульсов может быть
фиксированным или динамичным.
Всекциисмешиваниядозируютисмешиваютстрогоконтролируемыеобъемы пробыдля анализа и
буферного/окрашивающих растворов. Смешивание можноосуществлятьвчашке, всмесительной каме
ре. в центрифуге, в петледля образцов или втрубке, ведущей к проточной кювете.
В секции подсчета можно использоватьдисковую или проточную цитометрию. В случае примене
ния дисковой цитометрии тонкую пленку смеси наносят через насадку на верхнюю часть вертикально
вращающегосядиска. Эта вращающаяся поверхностьслужитподвижной предметнойплоскостью флуо
ресцентного микроскопа. При использовании проточной цитометрии часть смеси помещают в высокос
коростнойпотококружающейкорпусжидкостив капиллярной проточной кювете. В результатеускорения
смесь образует тонкую струю, в которойдинамически фокусируются и выравниваются в линию сомати
ческие клетки. Эта струя проходит передобъективом флуоресцентного микроскопа.
В некоторыхприборах всекции подсчетасодержитсядва канала. Исходя изобеспечения аналити
ческого качества, такаяситуациясчитаетсяэквивалентнойработесдвумяотдельнымимодулями, таким
образом, что рабочиехарактеристики оцениваются отдельнодля каждого канала.
5 Факторы, влияющие на результаты измерений
5.1 Сосуды для отбора проб
Сосуды для отбора пробдолжны быть пригодныдля переноса проб с места отбора проб влабора
торию без загрязнения или изменения состава.
Сосуды для отбора проб должны быть герметичными и после заполнения иметь достаточно сво
бодного объема. Слишком большой свободный объем может стать причиной вспенивания, слишком
малый свободныйобъем затруднит смешивание.
5.2 Отбор проб
5.2.1 Общие положения
Оборудование для отбора проб (т. е. колбы для проб, лабораторные стаканы и пробоотборники)
должно бытьчистым и сухим. Автоматические пробоотборникипри использованиидолжны соответство
ватьустановленным требованиям.
Рекомендуется немедленно охладить образцы для анализа после отбора до температуры
04С—6 вС ихранитьприэтой температуредо подсчета (см. 5.4) во избежание необходимости консерви
рования. Следует избегать замораживания. При необходимости консервирования соответствующие
способы химического консервирования образцовдля анализа установлены в 5.3.
5.2.2 Пробы сборного молока
Перед отбором проб необходимотщательно перемешатьсырое сборное молоко. При недостаточ
ном перемешивании соматические клетки будут концентрироваться в верхних инижних слоях.
5.2.3 Пробы молока отконкретных животных
Выделениесоматическихклеток в молокововремядоенияпроисходитнеравномерно. Дляполуче
ния репрезентативного результата подсчета для всего процесса доения необходимо получить репре
зентативные пробы для всего процесса доения. Для диагностических целейдостаточна выборка части
надоенного молока.
2