ГОСТ 33459-2015
7.8.2 Обработка результатов
Концентрацию жизнеспособных микроконидий в вакцине Y. млн/см3, рассчитывают по формуле
у „ & L .10*./,
6-0.5
(2)
’
где In - число колоний, выросших в шести чашках Петри, шт.;
6 - число засеянных чашек Петри;
0.5 - объем засеваемой вакцины, см3;
105 - степень разведения вакцины;
г - пересчет на одну иммунизирующую дозу, равную 1 см3.
Заокончательный результатпринимают среднеарифметическое значениепотрем флаконам(ампулам).
7.9 Определение безвредности
7.9.1 Общие принципы испытания безвредности - по ГОСТ 31926.
7.9.2 Подготовка к испытанию
7.9.2.1 Подготовка проб жидких вакцин
Из флаконов (ампул) с жидкой вакциной готовят объединенную пробу, объемом достаточным для
проведения испытания. Число отобранных для испытания ампул (флаконов) зависит от содержания в
них вакцины и выбранного вида животного.
7.3.2.2 Подготовка проб лиофилизированных вакцин
Для проведения испытания лиофилизированных вакцин их ресуспензируют до рабочего разведе
ния из расчета одна доза вакцины в 1см3разбавителя. Далее готовят объединенную пробу, отбирая из
каждого флакона (ампулы) равные объемы вакцины.
7.9.3 Проведение испытания
Подготовленную объединенную пробу вакцины вводят подкожно в область спины десяти белым
мышам в дозе 0.1 см3 или шести морским свинкам внутримышечно с наружной стороны бедра в дозе 0.5
см3, или трем кроликам внутримышечно с наружной стороны бедра в дозе 4.0 см3. За животными
наблюдают в течение десяти суток.
7.9.4 Обработка результатов
Вакцину считают безвредной, если все животные остаются живыми и клинически здоровыми в
течение срока наблюдения.
7.10 Определение иммуногенной активности
7.10.1 Иммуногенную активность вакцин проверяют путем вакцинации животных с последующим
заражением вирулентным штаммом и учетом числа заболевших и незаболевших животных. Для инак
тивированных вакцин допускается применение альтернативного метода контроля иммуногенной актив
ности по содержанию антигена (элементов гриба).
7.10.2 Подготовка к испытанию
7.10.2.1 Вакцину для испытания готовят по 7.9.2.
7.10.2.2 Подготовка культур вирулентных штаммов для заражения
Для заражения используют культуры вирулентных штаммов, выращенные в пробирках со ско
шенным сусло-агаром в течение 12-30 сут при температуре 37 °С - 38 СС. Культуру смывают, вно ся в
пробирку 5 см3 стерильной дистиллированной воды, интенсивно встряхивают для получения
споровой взвеси. Из пробирки берут пробу и подсчитывают концентрацию спор в камере Горяева по
7.7.1.
7.10.3 Проведение испытаний
7.10.3.1Иммуногенную активность проверяют в каждой первой серии вакцины, произведенной
из первой рабочей расплодки’, полученной из главного посевного материала производственного
1 Рабочая расплодка (Production seed) представляет собой культуру гриба, предназначенную только для
производства серий вакцины.
9