ГОСТ 29185—2014
П р и м е ч а н и е — Расплывчатое неслецифическое почернение среды может наблюдаться в тех слу
чаях. когда посев проводят в пробирки, а не в чашки Петри. Рост анаэробных бактерий, которые продуцируют
водород (а не H2S). может также уменьшить содержание сульфитов в питательной среде и привести к общему
почернению среды.
Подсчитывают колонии сульфитредуцирующих бактерий в каждой чашке Петри, где их количе
ство менее 150. а количество всех выросших колоний не превышает 300.
Когда число выросших колоний в пробирках большое, их трудно подсчитать. В этом случае для
подсчета могут быть использованы только те пробирки, в которых присутствуют отдельные колонии.
П р и м е ч а н и е — Методы, приведенные в стандарте, могут быть использованы для выявления суль
фитредуцирующих бактерий рода Clostridium. При этом после выявления типичных колоний берут 5 колоний с
каждой чашки и подтверждают принадлежность к роду Clostridium путем проведения дополнительных тестов.
9.6. Подтверждение принадлежности выделенных сульфитредуцирующих бактерий к
роду Clostridium
9.6.1 Микросиопированив
Из культур, выросших, как указано в 9.5. готовят два препарата и окрашивают по ГОСТ
30425: первый — по Граму. второй — для выявления бактериальных спор.
Сульфитредуцируюшие бактерии рода Clostridium представляют собой грамположитвльные
или грамвариабельные палочки, располагающиеся в одиночку, попарно, в виде цепочек или скопле
ний параллельных клеток. При спорообразовании споры сульфитрвдуцируюших бактерий рода
Clostridium овальные или сферические, субтврминальныв или терминальные.
Допускается окраску по Граму заменять тестом Грвгорсвна. Для этого на предметном
стекло в капле 3 %-ного водного раствора гидроокиси калия эмульгируют культуру микроорга
низмов. взятую из колонии с плотной среды. Если через несколько секунд взвесь ослизняется и за
петлей тянутся слизистые нити, то это указывает на принадлежность испытуемой культуры к
грамотрицательным бактериям. У грамположительных бактерий слизистых нитей не образует
ся.
9.6.2 Определение отсутствия каталазы
Отсутствие каталазы в культурах, выросших, как указано в п. 9.5, определяют по
ГОСТ 30425.
Сульфитредуцирующио бактерии рода Clostridium каталазуне образуют.
9.6.3 Подтверждение анаэробного роста
Подтверждение анаэробного роста проводят лосевом по ГОСТ 30425 культур, выросших, как
указано в п. 9.5. в чашки Петри под стекло или в трубки Вейона. или инкубируют посевы в анаэ
робных условиях. Для посева используют плотную питательную среду (5.1). Посевы инкубируют
по 9.4. Для сульфитредуцирующих бактерий рода Clostridium характерен анаэробный рост.
Допускается вместо подтверждения анаэробного роста проводить определение отсут
ствия роста в аэробных условиях. При этом культуры высевают в чашки Петри на поверхность
плот)Юй среды.
Посевы инкубируют в аэробных условиях при температуре (37 ± 1) °С в течение 18— 72 ч. а
для выявления термофильных бактерий — при температуре (50 ± 1)°С.
10. Обработка результатов
10.1 Результаты испытания оценивают по каждой пробе отдельно.
10.2 Если при изучении культуральных, морфологических и биохимических свойств обнаруже
ны сульфитредуцируюшие грамположитвльные или грамвариабельные. каталазоотрицательные,
способные расти в анаэробных условиях микроорганизмы, то дают заключение о том. что эти
микроорганизмы относятся к сульфитредуцируюшим бактериям рода Clostridium (мезофильным
или термофильным).
Если дополнительные подтверждающие тесты не проводились (9.6). то при наличии роста
типичных колоний дают заключение о том. что эти микроорганизмы от>юсятся к сульфитреду
цируюшим бактериям.
10.3 Если при подтверждении характерных колоний в 80% случаев, то есть не менее чем в 4
из 5 колоний подтвержден рост сульфитрвдуцируюших бактерий рода Clostridium, то считают.
5