ГОСТ 29185—2014
8 Приготовление пробы для испытания
Пробы для испытания приготавливают в соответствии с [11—[4], ГОСТ 26669 или стандартом на
конкретный продукт. При отсутствии соответствующего стандарта рекомендуется, чтобы заинтересо
ванные стороны достигли согласия поданному вопросу.
9 Метод проведения испытания
9.1 Общие требования
Схема проведения испытания приведена в приложении А.
9.2 Проба для анализа, исходная суспензия и разведения
См. [1] или конкретный стандарт на исследуемый продукт.
Если необходимо, для обеспечения гибели вегетативных форм иЛши неспорообразующих форм
бактерий применяют тепловую обработку исходной суспензии или жидкого продукта. Температура и
время тепловой обработки варьируют от умеренного теплового пастеризационного эффекта (напри
мер 75 °С в течение 20 мин) до кипения в течение нескольких минут. В этом случае результат подсче та
выражают как число спор сульфитредуцирующих бактерий, растущих в анаэробных условиях.
9.3 Инокуляция
Берут две стерильные чашки Петри. Переносят в каждую чашку с помощью стерильной пипетки
1 см3испытуемой пробы, если она жидкая, или 1 см3 исходной суспензии в случае испытания других
продуктов.
Берут две другие стерильные чашки Петри. Переносят в каждую чашку с помощью другой сте
рильной пипетки 1 см3 первого десятикратного разведения (10’ ) испытуемой пробы, если продукт
жидкий, или 1 см3первого десятикратного разведения исходной суспензии (102) при испытании дру гих
продуктов.
Повторяют описанную процедуру с последующими разведениями, используя для каждого оче
редного разведения новую стерильную пипетку.
При выявлении сульфитредуцирующих бактерий в определенной пробе для анализа ев высе
вают в чашку Потри или пробирку.
Помещают в каждую чашку Петри приблизительно 15 см3железосульфитного агара (5.3). кото
рый находится при температуре 44 °С — 47 °С в водяной бане (6.3). Время между инокуляцией чашек
Петри и заливкой их питательной средой не должно превышать 15 мин. Тщательно перемешивают
инокулят со средой и в горизонтальном положении дают среде застыть.
После того как среда застынет, вносят от 5 до 10 см3 той же среды для образования второго
слоя.
В случае использования для посева пробирок со средой инокулируют 1 см3 жидкого продукта
или разведением две пробирки со средой, находящейся при температуре 44 °С — 47 °С. Перемеши
вают осторожно содержимое пробирок, не допуская образования пузырьков воздуха в толще среды, и
помещают посевы в пробирках для застывания в холодную водяную баню.
После того как среда застынет, вносят от 2 до 3 см3той же среды в каждую пробирку для обра
зования второго слоя.
9.4 Посевы в чашках Петри инкубируют в анаэростате (6.4) при температуре (37 ± 1) °С в тече
ние 24 — 48 ч.
Если выявляют термофильные бактерии, готовят другие посевы (см. 9.3) и инкубируют их при
температуре (50 ± 1)°С.
В случае посева в пробирки инкубирование в анаэростате необязательно.
9.5 Подсчет колоний
После 24-48 ч термостатирования посевов подсчитывают количество колоний разной степени
черной окраски. При выявлении сульфитредуцирующих бактерий в определенной массе или объеме
пробы продукта для анализа подсчет количества выросших типичных колоний не проводят. Черные
колонии, окруженные черной зоной, относят к сульфитредуцирующим бактериям.
4