ГОСТ 32638—2014
М Е Ж Г О С У Д А Р С Т В Е Н Н Ы ЙС Т А Н Д А Р Т
МЕТОДЫ ИСПЫТАНИЯ ПО ВОЗДЕЙСТВИЮ ХИМИЧЕСКОЙ ПРОДУКЦИИ
НА ОРГАНИЗМ ЧЕЛОВЕКА
Метод оценки генных мутаций на клетках млекопитающих in vitro
OECD guidelines (or the testing o( chemicals. In vitro mammalian cell gene mutation test
Дата введения — 2015—06—01
1 Область применения
В тесте оценки генных мутаций на клетках млекопитающих in vitro используются культуры переви
ваемых клеточных линий или клеточные штаммы. Клетки отбираются на основе способности роста в
культуре и стабильности частоты спонтанных мутаций. Для тестов in vitro обычно требуется использо
вать экзогенный источник метаболической активации. Система метаболической активации не может
полностью воспроизводить условия, присутствующие у млекопитающих in vivo. Следует тщательно из
бегать условий, которые могут привести к результатам, не отвечающим реальной мутагенности. Пози
тивные результаты, не отвечающие реальной мутагенности, могут возникать вследствие изменения pH.
осмотической концентрации раствора, высокого уровня токсичности [8].
Тест применяется для скрининга потенциальной мутагенности и канцерогенности для млекопита
ющих. Многие вещества, позитивные в данном тесте, являются канцерогенами для млекопитающих.
Однако нет высокой корреляции между результатами данного теста и канцерогенностью. Степень кор
реляции зависит от класса химическихсоединений. Возрастает количество данных, показывающих, что
имеются канцерогены, которые не выявляются в данном тесте, поскольку они действуют через другие, не
генотоксические, механизмы или механизм их действия не выявляется в этих клетках [7].
2 Термины иопределения
2.1 время фенотипической экспрессии (Phenotypic expression time): период времени, в тече
ние которого неизмененные генные продукты заменяются новыми из мутантных клеток.
2.2 выживаемость (Survival): эффективность клонирования обработанных клеток на период
окончания воздействия; выживаемость обычно приводят как отношение к выживаемости контрольной
популяции клеток.
2.3 жизнеспособность (Viability): эффективность клонирования обработанных клеток во время
посева в селективных условиях после периода экспрессии.
2.4 мутагены типа замены пар оснований (Base pair substitution mutagens): вещества, которые
вызывают замену одной или нескольких пар оснований в ДНК.
2.5 мутагены типа сдвига рамки считывания генетического кода (фраймшифт мутагены)
(Frameshift mutagens): вещества, которые вызывают вставку или делецию одной или нескольких пар
оснований в молекуле ДНК.
2.6 относительный общий рост (Relative total growth): возрастание числа клеток за определен
ное время в опытном варианте по сравнению с контрольной популяцией клеток.
2.7 относительный суспензионный рост (Relative suspension growth): возрастание числа кле
ток за период экспрессии относительно отрицательного контроля.
2.8 прямая мутация (Forward mutation): генная мутация от родительского типа к мутантному
типу, которая приводит к изменению или потере активности фермента или функции кодируемого белка.
2.9 частота мутантов (Mutant frequency): отношение числа выявленных мутантных клеток к об
щему числу выживших клеток.
Издание официальное
1