ГОСТ 32891—2014
сколько раз для перемешивания раствора контрольного образца сычужного фермента и ставят в
ультратермостат температурой (35,0 ± 0,5) °С на 10 мин. Через 4 - 5 мин колбу вынимают из ультра
термостата, содержимое колбы перемешивают, встряхивая ее несколько раз. и снова помещают в
ультратермостат. По истечении 10 мин колбу с раствором контрольного образца сычужного фермента
вынимают из ультратермостата и охлаждают под струей проточной воды в течение не менее 10 мин до
температуры (20 ± 1)°С. Полученный раствор контрольного образца сычужного фермента доводят до
метки дистиллированной водой, затем переливают в коническую колбу вместимостью 250 см4 и
тщательно перемешивают.
Срок хранения раствора в холодильнике - не более 3 сут.
6.2.4.3 Приготовление раствора поваренной соли массовой концентрацией 100 г/дм3
100 г поваренной пищевой соли помещают в мерную колбу вместимостью 1 дм1, добавляют
дистиллированную воду и перемешивают. Объем раствора доводят дистиллированной водой до мет ки.
Срок хранения раствора при комнатной температуре - не более 5 сут.
6.2 4.4 Приготовление раствора соляной кислоты молярной концентрацией 1 моль/дм3
Раствор готовят разбавлением концентрированной соляной кислоты по ГОСТ 25794.1 (подпункт
2
.
1
.
2
).
Коэффициент поправки и точную молярную концентрацию определяют по ГОСТ 25794.1 (под
пункт 2.1.3, пункт 1.7).
Срок хранения раствора в емкости с притертой пробкой при комнатной температуре - не более
3 мес.
6.2.4.5 Приготовление солевого экстракта анализируемой пробы сычугов
30 г анализируемой пробы сычугов помещают в лабораторный стакан, приливают раствор по
варенной соли массовой концентрацией 100 г/дм3в соотношении 1 : 30 и оставляют при температуре
(19.0 ♦ 1,0) °С не менее чем на 5 ч, периодически перемешивая, или на ночь.
По окончании экстрагирования экстракт отфильтровывают через плотную ткань (лавсан и др.).
Для перевода неактивного предшественника химозина - прохимозина в активную форму, осуществ
ляют активацию солевого экстракта. Активную кислотность отфильтрованного солевого экстракта до
водят раствором соляной кислоты молярной концентрации 1 моль/дм1до значения 4.6 - 4.7 ед. pH и
выдерживают 12 - 16 ч при комнатной температуре. Замеряют объем активированного экстракта.
6.2.4.6 Приготовление кислотного экстракта анализируемой пробы сычугов
30 г анализируемой пробы сычугов помещают в лабораторный стакан, приливают дистиллиро
ванную воду в соотношении 1 : 30 и оставляют при температуре (19.0 ± 1.0) °С на 2 ч, периодически
перемешивая и поддерживая активную кислотность смеси на уровне 1,5 - 2.0 ед. pH раствором соля ной
кислоты молярной концентрации 1 моль/дм3. По окончании экстрагирования экстракт отфильтро
вывают через плотную ткань (лавсан) и замеряют объем отфильтрованного кислотного экстракта.
6.2.5 Проведение определений
6.2.5.1 Измерение продолжительности свертывания раствора молочного субстрата раствором
контрольного образца сычужного фермента и экстрактом, полученным по 6.2.4.5 или 6.2.4.6, проводят в
двух параллельных определениях.
6.2.5.2
В
два стакана вместимостью по 100 см3с помещенными в них стеклянными палочками
вносят по 50 см3раствора молочного субстрата. Стаканы устанавливают в ультратермостат темпера
турой (35,0 ± 0,5) °С и оставляют на 10 - 15 мин. При этом уровень воды в бане термостата должен
быть не ниже уровня молочного субстрата в стаканах. Затем в каждый стакан вносят по 0.5 см3рас
твора контрольного образца сычужного фермента и в начале внесения включают секундомер. Со
держимое стаканов тщательно перемешивают стеклянными палочками в течение 3 - 5 с и оставляют в
покое на 1 мин. После чего периодически с интервалом в 1 - 2 с стеклянной палочкой осторожно на
стенки стакана наносят раствор молочного субстрата.
В
свете настольной лампы наблюдают за по
явлением хлопьев в стекающем слов раствора молочного субстрата и фиксируют время их образова
ния.
Продолжительность свертывания молочного субстрата отсчитывают с момента внесения рас
твора контрольного образца сычужного фермента до момента появления хлопьев.
За окончательный результат измерения принимают среднеарифметическое значение результа
тов двух параллельных определений, допускаемое расхождение между которыми не превышает 6 с.
В
противном случае анализ повторяют.
6.2.5.3 Измерение продолжительности свертывания раствора молочного субстрата экстрактом
по 6.2.4.5 или 6.2.4.6 проводят по 6.2.5.2. Предварительно готовят десятикратное разведение экс
тракта анализируемых сычугов дистиллированной водой.
Допускаемое расхождение между параллельными измерениями продолжительности свертыва
ния молочного субстрата - 10 с.
6