ГОСТ 32251—2013
9.5 Приготовление раствора для послеколоночной дериватизации (только при исполь
зовании РВРВ)
Растворяют 25 мг РВРВ (см. 5.3) в 500 см3
во
д
ы
(
см
.
5.2).
Срок хранения в темном месте при комнатной температуре - не более 3 сут.
П р и м е ч а н и е — Раствор используется только в сочетании с подвижной фазой А (см. 9.3).
9.6 Приготовление смеси толуола с ацетонитрилом
Смешивают толуол (см. 5.5) и ацетонитрил (см. 5.6) в объемном соотношении 98 : 2.
9.7 Приготовление градуировочных растворов для ВЭЖХ
9.7.1 Приготовление основного стандартного раствора афлатоксина Bt
Из афлатоксина Bi (см. 5.10) готовят основной стандартный раствор массовой концентрации
10,0 мкг/см3в смеси толуола с ацетонитрилом (см. 9.6).
П р и м е ч а н и е
1 Афлатоксины разрушаются под действием света. Анализируемая проба во время лабораторных ис
пытаний должна быть защищена от дневного света. Стандартные растворы афлатоксина следует держать за
щищенными от света, используя пробирки изжелтого стекла или алюминиевую фольгу.
2 Основной стандартный раствор афлатоксина В, в смеси толуола с ацетонитрилом остается стабиль
ным в течение года, если его хранить в стеклянной посуде, промытой кислотой, при температуре минус 18 "С в
темноте. Если основной стандартный раствор используются в течение 3 мес. то в качестве растворителя можно
взять метанол (см. 5.7). Растворы в метаноле более чувствительны к щелочной среде на стеклянной поверхно
сти и к дневному свету, чем растворы в смеси толуола с ацетонитрилом.
Колбы плотно заворачивают в алюминиевую фольгу и хранят при температуре не выше 4 °С.
Чтобы определить точную массовую концентрацию афлатоксина Bi в основном стандартном раство
ре, записывают кривую поглощения в интервале длин волн от 330 до 370 нм в кюветах (см. 6.20) от
носительно растворителя, используемого для приготовления основного стандартного раствора, по
мещенного в эталонную кювету спектрометра (см. 6.19).
Вычисляют массовую концентрацию афлатоксина В,. са, мкг/см3. используя уравнение
-100
с,=
А
М
и__________
(D
где
Ат
t - спектральная поглощательная способность, определенная при макси муме кривой
поглощения;
Ма - молярная масса афлатоксина В,, г/моль (312 г/моль);
100 - коэффициент пересчета;
г.
- молярная поглощательная способность афлатоксина В,. м2/моль (1930 м2/моль для рас
твора в смеси толуола с ацетонитрилом и 2150 м2/моль для раствора в метаноле);
d - оптическая длина пути ячейки, см (1 см).
9.7.2 Приготовление градуировочного раствора афлатоксина В, массовой концентрации
50,0 нг/см3
Из основного стандартного раствора афлатоксина Bi (см. 9.7.1) готовят градуировочный рас
твор афлатоксина В, массовой концентрации 50.0 нг/см3 в смеси толуола с ацетонитрилом (см. 9.6)
или в метаноле (см. 5.7).
9.7.3 Приготовление рабочих градуировочных растворов
В пять мерных колб вместимостью по 20 см3 микродозатором (см. 6.16) переносят градуиро
вочный раствор (см. 9.7.2) в объемах, указанных в таблице 1 (вариант 1 или 2). Смесь толуола с аце
тонитрилом выпаривают до полной сухости в токе азота при комнатной температуре. Если для приго
товления основного стандартного раствора используют метанол, выпаривание не требуется.
5