ГОСТ 32365—2013
Спектрофотометр с диапазоном измерения длин волн от 210 до 700 нм, допустимой абсолютной
погрешностью коэффициента пропускания не более 1 %, спектральной шириной не более 1 нм.
Дозаторы пипеточные объемами 0,5; 0,1; 0,05 см3и относительной погрешностью ± 1 %.
Секундомер 2-го класса точности с емкостью шкалы счетчика 30 мин. ценой деления 0,20 с, по
грешностью ± 0,60 с.
Пипетки 2-1-10; 2-1-15 по ГОСТ 29169.
Колбы 2-250-2; 2-500-2; 2-1000-2 по ГОСТ 1770.
Кюветы фотометрические из оптического стекла или полистирола (одноразовые) толщиной по
глощающего слоя 1 см для измерений при длинах волн 334. 340 или 365 нм.
Шпатели пластиковые одноразовые или палочки стеклянные оплавленные длиной от 10 до 15 см
для перемешивания содержимого кюветы при проведении фотометрических измерений.
Бумага индикаторная универсальная для интервала измерений активной кислотности от 1 до
10 ед. pH.
Калий фосфорнокислый двузамещенный 3-водный по ГОСТ 2493. ч. д. а.
Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
Кислота серная по ГОСТ 4204. х. ч.
Аммоний сернокислый по ГОСТ 3769, ч. д. а.
Алкогольдегидрогеназы ЕС1.1.1.1 лиофилизат из дрожжей Saccharomyces cerevisiae, активно
стью 4500 мкмоль мин’1.
Альдегиддегидрогеназы ECl.2.1.5 лиофилизат из дрожжей Saccharomyces cerevisiae, активно
стью 5,6 мкмоль мин’1.
Никотинамидадениндинуклеотид фосфат с содержанием основного вещества не менее 98 %.
Спирт этиловый ректификованный высшей очистки по ГОСТ 18300.
Допускается применение других средств измерений и вспомогательного оборудования, не уступа
ющих вышеуказанным по метрологическим и техническим характеристикам и обеспечивающих необхо
димую точность измерения, а также реактивов по качеству не хуже вышеуказанных.
7.3 Подготовка к анализу
7.3.1 Приготовление раствора серной кислоты молярной концентрации с (1/2 H2S04)=2 моль/дм3
Растворсерной кислоты молярной концентрации с(1/2 H2S04) =2моль/дм3готовятпоГОСТ 25794.1
в колбе вместимостью 1000 см3 разбавлением 58,0 см3 серной кислоты плотностью 1.830 г/см3 или
57.2 см3серной кислоты плотностью 1.835 г/см3дистиллированной водой до объема 1000 см3, или из
стандарт-титра молярной концентрации с (1/2 H2S04) = 0.1 моль/дм3, переводя количественно содер
жимое двух ампул в мерную колбу вместимостью 100 см3и добавляя дистиллированную воду до метки.
Срок хранения раствора при температуре (20 ± 2) X - не более 6 мес.
7.3.2Приготовлениерастворааммониясернокислогомолярнойконцентрации
с (1/2 (NH4)2S04) = 2,2 моль/дм3
В мерную колбу с пришлифованной пробкой вместимостью 1000 см3 вносят 299.55 г аммония
сернокислого, добавляют 300 см3дистиллированной воды и перемешивают до полного растворения.
Доводят объем раствора в колбе до метки дистиллированной водой, закрывают колбу пробкой и тща
тельно перемешивают.
Срок хранения раствора при температуре (20 ♦ 2) С - не более 6 мес.
7.3.3 Приготовление буферного раствора
В мерную колбу с пришлифованной пробкой вместимостью 50 см3вносят 8.3 г фосфорнокисло
го калия двузамещенного 3-водного, добавляют 40 см3дистиллированной воды и перемешивают до
полного растворения. Доводят значение pH раствора до 9.0 ед. pH раствором серной кислоты по 7.3.1.
Доводят объем раствора в колбе до метки дистиллированной водой, закрывают колбу пробкой и
тща тельно перемешивают.
Срок хранения буферного раствора при температуре (4 ± 1) X - не более 6 мес.
7.3.4 Приготовление суспензии АДГ
В мерную колбу (с пришлифованной пробкой) вместимостью 5 см3вносят 0.125 г АДГ лиофилиза-
та и добавляют до метки раствор аммония сернокислого по 7.3.2. закрывают колбу пробкой и тщатель
но перемешивают.
Срок хранения суспензии АДГ при температуре (4 ± 1) °С - не более 2 мес.
7.3.5 Приготовление реакционной смеси
0,0028 г АЛДГ лиофилизата и 0.028 г НАД растворяют в 7 см3буферного раствора по 7.3.3.
7