ГОСТ 31960-2012
Д.В 2.7.4 Порядок проведения измерений
Измерения интенсивности флуоресценции клеток водорослей в пробах проводят в соответствии с руко
водством (инструкцией) по эксплуатации прибора с учетом условий проведения градуировки прибора noQ.B.2.3.
Измерение значений интенсивности флуоресценции водорослей каждой аликвоты пробы проводят не
менее трехраз в следующей последовательности:
- измеряют значения интенсивности флуоресценции холостой пробы (см. Д.В.2.1.1);
- измеряютзначения интенсивностифлуоресценцииклетокводорослей контрольной пробы (см.Д.В.2.1.3):
- измеряют знаменияинтенсивности флуоресценции клеток водорослей каждой заданной кратности раз
бавления (концентрации) анализируемой пробы, начиная с меньшихконцентраций (больших разбавлений):
- измеряют знамения интенсивности флуоресценции пробы контроля фона (см. Д.В.2.1.2).
При ме ча ни е - После измерения интенсивности флуоресценции клеток водорослей контрольной
пробы и затем после каждого измерения анализируемой концентрации (разбавления) пробы, кювету ополаски
вают питательной средой.
Д.В.2.8 Обработка результатов измерений
Д.В.2.8.1 При наличии компьютерной системы сбора и обработки данных, порядок обработки результа
тов измерений устанавливают в соответствии сруководством (инструкцией) по эксплуатации прибора или
обработки данных на компьютере.
Д.В.2.8.2 При отсутствии компьютерной системы сбора и обработки информации значение интенсив
ности флуоресценции аликвоты пробы Врассчитывают по формуле
В =В ^ - В Х.(Д.В.З)
где Впр- среднеарифметическое значение из измеренных значений интенсивности флуоресценции клеток
водорослей анализируемой пробы, отн.вд.:
B.f - среднеарифметическое значение из измеренных значений интенсивности флуоресценции холостой
пробы, отн.вд.
Д.В.2.8.3 Плотность (численность) клеток водорослей Ха1Гклелюк/см3, в аликвоте анализируемой пробы
определяют по соответствующей градуировочнойхарактеристике (см. Д.В.2.4). используя значение В. рассчи
танное по формуле (Ц.В.З). либо рассчитывают по формуле
где Ь - угловой коэффициент (наклон) градуировочной характеристики, рассчитанный по формуле (Д.В.2),
отн.вд. см*/клвток.
Д.В.2.8.4 Если полученное значение, найденное по Д.В.2.8.3. превышает верхнюю границудиапазона гра
дуировочной характеристики, то анализируемую пробу разбавляют так. чтобы значение вразбавленной пробе
укладывалось в диапазон градуировочной характеристики, либо анализируют меньший объемпробы.
Д.В.2.8.5 Плотность (численность) клеток водорослей в анализируемой пробе X. клвток/см3. рассчиты
вают по формуле
X = \ V^ f .(Д.В.5)
vnp
гдеХа„ - плотность (численность) клеток водорослей в аликвоте анализируемой пробы, рассчитанная по
формуле (ДВА), клвток/см*;
VUK- вместимость мерной колбы, использованное для подготовки анализируемой пробы, см3;
Упр- объем аликвоты анализируемой пробы, см*:
(- коэффициент разбавления анализируемой пробы, при этом, если пробуне разбавляли, то /
принимают равным единице, еслиразбавляли (см. Д.В.2.8.4). то f рассчитывают поформуле
( = £ ..(Д.В.6)
* а
где V, - вместимость мерной колбы, использованной при разбавлении анализируемой пробы,
с
а
г
*:
Va- объем аликвоты анализируемой пробы, взятый дляразбавления, см3.
Д.В.2.8.6 Зарезультат измерений плотности (численности) клеток водорослей принимают срвднеариф-
метическов результатов не менее двух определений, если расхождение между ними не превышает ±5%.
Д.В.З Для определения плотности {численности) клеток водорослей допускается использовать турбодиме-
трию и фотометрию, при условии их достаточной чувствительности и корреляции с плотностью (численностью)
клеток водорослей. При этом используемый прибор должен быть способен измерять такие низкие плотности
(численности) клеток водорослей как 104 клеток/см3. а также отличать эффект роста плотности (численности)
клеток водорослей от эффекта мешающего воздействия, например, присутствие твердых частиц и цвет
пробы. Спектрофотометры обладаютдостаточной чувствительностью для измерения плотности (численности)
клеток во дорослей 104клеток/см3при достаточной длине оптического пути (до 10 см), однако этот метод
особенно чувстви телен к /вешающемувлияниюсуспендированного материала и окрашенных веществ при низких
плотностях клеток водорослей. Для мутных проб предпочтительна флуориметрия (см. Д.В.2).
30