ГОСТ 31960-2012
5.4.3 Процедура тестирования
5.4.3.1 В каждую колбу (см. 5.4.1 и 5.4.2) вместимостью 250 см3. вносят по 100 слт3 анализи
руемой пробы (см. 5.3.3.6). затем в каждую колбу добавляют рассчитанный объем суспензии водо
рослей в экспоненциальной фазе роста (см.5.3.3.8), перемешивают, выдерживают 30 мин на свету и
определяют плотность (численность) клеток водорослей, соответствующую началу тестирования,
по приложению Д.В.
Плотность (численность) клеток водорослей в начале тестирования должна находиться в преде
лах 2.0 ■10й - 2.5 ■10х клеток/см3.
5.4.3.2 Для каждой анализируемой пробы (разбавлений, концентраций) подготавливают контроль
ную пробу следующим способом: в три конические колбы вместимостью 250 см3 вносят по 100 см3
питательной среды Гэльдберга [см. А.1.2 (приложение А)], добавляют по 1.0 см3суспензии водорослей
в экспоненциальной фазе роста (см. 5.3.3.8). перемешивают, выдерживают 30 мин на свету и опре
деляют плотность (численность) клеток водорослей соответствующую началу тестирования, ло при
ложению Д.В. При этом плотность (численность) клеток водорослей в контрольной пробе
должна находиться в пределах 2.0 ■10* -2,5- 10* клеток/см3.
При ме ча ни е - Чтобы получить в начале тестирования плотность (численность) клеток водо
рослей в пределах от 2 ■10* до 2.5 - 104 клеток/см3. достаточно в каждую колбу внести 1.0 см3 суспензии
водорослей из культуры, плотность (численность) которой находится в пределах от 2 - 1СА до 2.5 - 1Ф
клеток/см3
Минерализация (солемсть) контрольно пробы должна соответствовать минерализации (со
лености) анализируемой пробы.
5.4.3.3 Колбы с пробами, подготовленными по 5.4.3.1. 5.4.3.2. закрывают ватно-марлевыми
пробками, встряхивают и помещают в климатостат.
П ри ме чан ия
1Колбы с водорослямидолжны быть закрытыми для предотвращения снижения испарения раствора; одна
ко колбы не следует закрывать герметично, чтобы обеспечить воздухообмен, рекомендуется применять ватно
марлевые пробки.
2 Клетки водорослей необходимо поддерживать во взвешенном состоянии, путем легкого встряхивания кол
бы (например, вручную), чтобы обеспечить единый уровень pH и газовый режим в различных слоях анализируе
мой пробы.
3 Значение pH контрольной пробы при тестировании не должно меняться более чем на ± 1.0ед. pH.
Тестирование проводят в течение 72 ч или 96 ч (в зависилюсти от анализируемой пробы)
в климатостатв при температуре (20 ± 2) °С. имитируя светлый период суток - 16 ч и темный
период - 8 ч. Содержимое каждой колбы перемешивают (встряхивают вручную) один-два раза в
сутки.
Климатостат должен обеспечивать равномерное и белов освещение в диапазоне от 3000 до
6000 лк на расстоянии 0.35 м от поверхности анализируемых проб в колбах.
5.4.3.4 Через каждые 24 ч тестирования определяют плотность (численность) клеток водорос
лей в каждой колбе (включая контрольную) в соответствии с требованиями приложенияД.В.
5.5 Обработка результатов
5.5.1 По результатам подсчета плотности (численности) клеток водорослей для каждого за
данного разбавления (концентрации) анализируемой пробы по трем емкостям, в том числе кон
трольной. рассчитывают среднеарифметическое значение плотности (численности) клеток водо
рослей.
5.5.2 Определение токсичности анализируемых проб
5.5.2.1Токсический эффект анализируемых проб определяют по снижению плотности (чис
ленности) клеток водорослей для каждого заданного разбавления (концентрации) анализируемой
пробы, относительно контрольной пробы А, %, после 72 ч (96 ч) тестирования и рассчитывают по
формуле
А = ■*< ~ *ан 100.(2)
Я*
12