ГОСТ 31960-2012
ПРИЛОЖЕНИЕ Д.В
(обязательное)
Методы подсчета численности клеток водорослей
Д.В.1 Определение плотности (численности) клеток водорослей методом прямого
счета в камере Горяева
Подсчет плотности (численности) клеток водорослей в камере Горяева (см. рисунок Д.В. 1) проводят
следующим способом:
Содержимое колбы с водорослями перемешивают вручную, затем пипеткой отбирают суспензию водо
рослей (аликвоту) и наносят поодной капле на верхнюю инижнюю части сетки счетной камеры Горяева. Затем
камеру накрывают покровным стеклом, которое притирают по бокам до появления колеи интерференции.
П ри м е ча ни я
1Взятую в пипеткукаплю суспензии водорослей необходимо очень быстро нанести на поверхность сет
ки. пока клетки водорослей не успели осесть в нижней части пипетки.
2 Нанесенную на поверхность сетки каплю суспензии водорослей следует быстро накрыть покровным
стеклом и притереть его во избежание оседания клеток водорослей из капли.
3 После притирания покровного стекла и при подсчете клеток водорослей под микроскопом необходимо
следить за тем. чтобы жидкость под покровным стеклом была распределена равномерно.
4 Кахюры Горяева обычно имеютдве сетки, разделенные желобком. В такихкамерах наносят параллель
но две капли суспензии водорослей.
Капли суспензии водорослей наносят не подряд из одной пипетки, а при двукратном взятии суспензии в
пипетку из одной и той же колбы.
Через 1 -2 мин после оседания клеток водорослей камеруГоряевапомещают под объектив микроскопа и
подсчитывают количеслюо клеток водорослей во всех 25 больших квадратах сетки.
П ри меча ни я
1После подсчета клеток водорослей камеру Горяева сразу же тщательно моют водопроводной водой и
протирают мягкой тканью (например, фланелью).
2 Подсчет числа клеток водорослей в камере Горяева рекомендуется проводить при плотности (числен
ности) клеток (1.0-2.5) - 1& клетох/см5. так как при большей плотности (численности) клеток водорослей в
суспензиях подсчет трудоемок и менее точен.
а - оОиэЛ
ви
д
ашюрыГЪртва
\J
IH-KJ
Ь- ВМДCfocyГЬрмм
с -у м п н в н тй фрагмент сопи
для
подсчета
клеток водрросгюА.
выслан ода большое вводят
Рисунок Д.В. 1- Счетная камера Горяева
Плотность (численность) клеток водорослейX в 1см3суспензииводорослей рассчитывают по формуле
Х = М-104.(ДВ.1)
где М - cyiMtapnoe количество клеток водорослей в учтенных больших квадратах сетки;
10х- коэффициент пересчета кубических миллиметров в кубические сантиметры.
Плотность (численность) клеток водорослей подсчитывают в каждой колбе, отбирая по две аликвоты.
27