ГО СТ 31504— 2012
Части рабочего раствора смеси пяти синтетических красителей массовой концентрации 10 мкг/см3
переносятвмерные колбы вместимостью 100 см3,добавляют небольшое количество бидистиллирован
ной воды и перемешивают. Объем раствора доводят бидистиллированной водой до метки.
9.1.5 Установление градуировочной характеристики
Каждый рабочий раствор хроматографируют по два раза, начиная с наименьшей концентрации,
принимая за результат среднеарифметическое значение двух параллельных измерений.
Условия хроматографирования:
- объем вводимой пробы — 0.02 см3;
- состав подвижной фазы: А — буферный раствор, В — ацетонитрил;
- скорость потока элюента — 0,7 см3/мин.
Условия градиентного элюирования представлены втаблице 2.
Т а б л и ц а 2
Время анализа, мин
Состав подвижной фазы. %
А — буферный раствор
В — ацетонитрил
0
85
15
1
85
15
12
30
70
15
10
90
22
85
15
Время выхода синтетических красителей устанавливают при проведении градуировочных работ.
Для этого оптимальной является массовая концентрация 5.0 мкг/см3; (см. таблицу 1).
Время выхода синтетических красителей указано в таблице 3.
Т а б л и ц а 3
Наименование синтетического
красителя
Длина волны поглощения, нм
Время выхода, мин
Индигскармин
350
13.50 ± 0.15
Желтый оСолнечный закат»
500
13.80 ± 0.15
Азорубин
500
14.60 ± 0.15
Тартразин
450
15.00 ± 0.15
Понсо 4R
500
15.60 ±0.15
9.1.6 Построение градуировочного графика
Для построения градуировочного графика измеряют площади пиков, соответствующие массовой
концентрации синтетических красителей в градуировочных растворах. По полученным данным рассчи
тывают коэффициенты регрессии
а
и Ь прямой У= аС, + Ь методом наименьших квадратов.
Градуировочный график строят с учетом вычисленных значений уравнения
Y =aC ,+b.
(4)
где У — площадь пика синтетических красителей:
а
и
b —
коэффициенты регрессии;
С, — массовая концентрация синтетических красителей вградуировочном растворе, мкг/см3.
Контроль градуировочногографика осуществляют каждый раз перед началом измерений не менее
чем подвум точкам в рабочем диапазоне измерений. Для контроля применяют градуировочные раство
рысинтетическихкрасителей. Полученные при хроматографировании значенияУ недолжны отклонять
ся от градуировочной прямой: более чем на 5.34 % для индигокармина: 2.96 % для желтого «Солнечный
закат»; 1.86 % для тартразина; 2,97 % для понсо 4R и 1.44 % для азорубина.
7